刘 仔 陈继英 柯颖川 杨光英

1.广东省东莞市中医院药学部，广东 东莞 523000；2.广东省东莞市食品药品检定所，广东 东莞 523000

心脉康片是根据李斐媛等[1]运用软坚散结法防治动脉粥样硬化的经验方，运用现代的制药技术研制而成的中药制剂。心脉康片相对传统的心脉康汤具有服用携带方便、稳定性好、易于储存等优点。近年来对心脉康方及心脉康片进行了较深入的临床研究。余沛扬等[2]报道，64例脑动脉硬化症患者随机分为治疗组 （心脉康方组）33例和对照组（尼莫地平组）31例，疗程均为4周。结果显示心脉康汤剂与尼莫地平对脑血管硬化症主要症状及平均血流速度有改善，但心脉康方组汤剂对头晕头痛、头昏感、精神萎靡、行动迟缓、健忘等临床症状的改善优于尼莫地平。邓志刚等[3]报道，颈动脉内膜-中层（IMT）增厚与斑块形成的患者，随机分成心脉康组、血脂康组、西药组，分别给予心脉康片、血脂康胶囊、辛伐他汀6个月，三组患者的颈动脉IMT与斑块均有消退，但以心脉康组更为显著。而且心脉康片能更有效降低颈动脉粥样硬化患者血清hsCRP，从而降低急性心肌梗死、急性脑梗死等心脑血管并发症[4]。笔者先前已经对心脉康片中的主要成分枳实、三棱、莪术进行定性鉴别和莪术中莪术醇进行含量测定[5]；本文主要从成型工艺和测定心脉康片中另一个重要的有效成分辛弗林含量的角度对心脉康片进行更深入的研究，为了更好地制备和控制该制剂的质量提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

热循环回流提取浓缩回收机组（衡阳永晖制药设备有限公司）；V型高效混合机（V-500，衡阳永晖制药设备有限公司），槽型混合机（CH-200，衡阳永晖制药设备有限公司）；摇摆式颗粒机 （YK160，衡阳永晖制药设备有限公司）；超微粉碎机（WFJ-15，衡阳永晖制药设备有限公司）和热风循环烘箱（CT-C，衡阳永晖制药设备有限公司）；旋转式压片机（ZP-19，上海天祥·健台制药设备有限公司）；片剂四用测定仪78X-02型 （上海西域机电系统有限公司）；电子分析天平FA1104N（上海民桥精密科学仪器有限公司）；Agilent1200高效液相色谱仪 （美国Agilent公司）；AG-245电子分析天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 试药

醋鳖甲（批号：20110902）、醋三棱（批号：20120215）、醋莪术（批号：20120123）、枳实（批号：20120118）、胆南星（批号：20120116）和有瓜石斛（批号：20120121），均为东莞市国药集团中药饮片公司提供；心脉康片 （批号：20120623、20120701、20120705，本院自制）；辛弗林对照品（批号：0727-200105，中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，其他所用试剂均为AR级。

2 成型工艺的研究

2.1 片型的选择

中药片剂按其制备用的原料特性有四种类型：提纯片、全粉末片、全浸膏片和半浸膏片[6]。笔者根据处方特点选择了半浸膏片，也就是将处方部分饮片细粉与其余药料制得的稠膏混合制成的片剂。本品由醋鳖甲、醋三棱、醋莪术、枳实、胆南星和有瓜石斛六味中药材组成。经过大量的预实验研究，初步拟定心脉康片的制法为：将醋三棱和醋莪术各一半药材粉碎成细粉，过筛，得粉①；剩余醋三棱、醋莪术及另外四味加水提取浓缩成稠膏，干燥成干膏，粉碎成细粉，得粉②；将粉①与粉②混匀，加辅料适量，制成颗粒，压片。根据此制法，下面重点对心脉康片的成型工艺进行研究。

2.2 成型工艺的研究

2.2.1 填充剂的选择 采用单因素实验法，以制粒难易、压片情况、片剂的外观、硬度和崩解时限为考察指标对淀粉、糖粉、糊精3种填充剂进行考察。结果见表1，淀粉为填充剂时均出现裂片现象，糖粉为填充剂时均出现粘冲现象，糊精压制的片剂外观和硬度较好。因此选择糊精为填充剂。

表1 填充剂的选择试验结果（n=6）

2.2.2 润湿剂和黏合剂的选择 采用单因素实验法，以制粒难易、颗粒的硬度、压片情况、片剂的外观、硬度和崩解时限为考察指标，对水、不同浓度的乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠溶液进行考察。结果见表2，以水、淀粉浆、羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂时，软材的黏性太大，制粒过筛困难，而且制得的颗粒偏硬，压片时出现裂片，片剂外观不够光滑。以50%乙醇为黏合剂时，容易制粒和压片，片剂外观、硬度和崩解时限都符合要求。因此，选择50%乙醇为润湿剂。

表2 润湿剂和黏合剂的选择试验结果（n=6）

2.2.3 颗粒烘干温度和时间的选择 压片物料中的醋三棱粉和醋莪术粉含有挥发油，为了更好地保留有效成分，选择60℃为颗粒烘干温度。以干颗粒的水分含量为指标，对颗粒烘干时间进行考察。试验结果显示：当烘干时间为2 h时，干颗粒的水分含量在4%～6%。因此选择2 h为颗粒的烘干时间。

2.2.4 润滑剂的选择 压片前必须加入润滑剂，增加颗粒流动性，减少颗粒与冲模的摩擦力。常用润滑剂有滑石粉和硬脂酸镁，经过预实验确定硬脂酸镁为润滑剂更适用于本品。采用单因素实验法，以是否粘冲和片剂外观为考察指标，对硬脂酸镁的用量进行考察。试验分别考察了质量分数为0.3%、0.5%、0.8%的硬脂酸镁，结果表明，当质量分数为0.3%时有粘冲现象；质量分数为0.5%和0.8%时，无粘冲现象，而且片剂外观完整光洁。从物料成本考虑，选择质量分数为0.5%的硬脂酸镁为心脉康片的润滑剂。

2.2.5 最佳成型工艺 经过选优心脉康片的最佳成型工艺确定为：以糊精为填充剂，50%乙醇为润湿剂，干法制粒，60℃烘干2 h，0.5%硬脂酸镁为润滑剂，压片，即得。

2.3 成型工艺的验证

根据“2.2.5”项下的成型工艺制备三批心脉康片（批号：20120623、20120701、20120705）；结果显示：三批样品外观完整光洁，硬度平均为4.6 kg，崩解时间分别为16、14、17 min，片重差异均符合片剂的要求。

3 辛弗林的含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil 100-5 C18反相柱 （5 μm×250 mm×4.6 mm）；流动相：甲醇-磷酸二氢钾水溶液（50∶50）；流速：1 mL/min；柱温：30℃；检测波长：275 nm；进样量：20 μL。在上述色谱条件下，辛弗林与其他组分峰能达到基线分离。

3.2 溶液的制备

3.2.1 对照品溶液的制备 精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥4 h的辛弗林对照品适量，加水稀释成24.5 μg/mL的溶液作对照品溶液。

3.2.2 供试品溶液的制备 精密称取样品细粉（10片），置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定重量，加热回流1.5 h，放冷，再称定重量，用甲醇补足重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液10 mL，蒸干，残渣加水10 mL使溶解，摇匀，通过聚酰胺柱（60～90 目，2.5 g，内径 1.5 cm，干法装柱），用水25 mL洗脱，收集洗脱液，转移至25 mL量瓶中，加水稀释至刻度，作供试品溶液。

3.2.3 阴性对照溶液的制备 取缺少枳实的心脉康片处方药材，按照制备工艺配制心脉康片，然后按照供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。

3.3 方法的专属性考察

按照“3.1”项下的色谱条件，对对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液进行分析，结果阴性对照溶液无干扰。见图1。

3.4 线性关系的考察

精密称取辛弗林对照品16.32 mg，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。分别取此溶液 1.0、2.0、4.0、8.0、20.0 mL，置 50 mL 量瓶中，用水稀释得系列标准液。取储备液及系列标准液各20 μL进样，记录峰面积。以峰面积A对浓度X（μg/mL）计算，得回归方程：A=9318.3X+623.2（r=0.9999，n=6），呈良好线性关系。结果表明，辛弗林对照品的进样量在0.06528～1.30560 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

图1 辛弗林对照品、心脉康片和阴性对照溶液的HPLC图谱

3.5 精密度试验

精密吸取上述对照品溶液按照“3.1”项下色谱条件，连续进样6次，记录色谱图，测得峰面积相对标准偏差（RSD）为1.23%（n=6），实验结果表明，在该条件下仪器精密度良好。

3.6 稳定性试验

精密吸取同一批供试品溶液（批号：20120623），分别在配制后 0、2、4、6、8、24 h 进样，记录色谱图，测得峰面积相对标准偏差（RSD）为1.36%（n=6），表明供试品溶液在配制后24 h内稳定。

3.7 重复性试验

分别精密称取同一批心脉康片样品（批号：20120623）6份，按照供试品溶液制备方法制备，依法测定辛弗林含量，结果平均含量为 1.4132 mg/g，RSD 为 1.2%（n=6），表明该方法重现性较好。

3.8 加样回收率试验

精密称取6份同一批（批号：20120623）已知含量（1.4132 mg/g）的样品粉末1 g，分别置于具塞锥形瓶中，精密加入对照品储备液（0.1632 mg/mL）10 mL，照本品含量测定方法进行测定并计算回收率，结果平均回收率为98.35%，RSD为1.19%（n=6），表明本方法准确度良好。见表3。

3.9 样品含量的测定

取三批心脉康片样品 （批号：20120623、20120701、20120705），按“3.2.2”项下供试品溶液制备方法操作，以“3.1”项下色谱条件测定，每批样品测定3次取平均值，按外标法计算每1克心脉康片中辛弗林的含量，结果分别为1.41、1.36、1.44 mg。本品每1克心脉康片含辛弗林不得少于1.25 mg。

表3 辛弗林加样回收率结果

4 讨论

心脉康片是选择半浸膏片法进行制备的，醋三棱和醋莪术一半粉碎成细粉入药，既可以作为填充剂，又可以使片剂具有较好的崩解时限。笔者考察了水、不同浓度的乙醇溶液、1%羧甲基纤维素钠溶液、10%淀粉浆为制粒的黏合剂和润湿剂，其中以50%乙醇作为制粒的润湿剂压片，片剂的外观、硬度、片重差异和崩解时限均达到要求，效果较好。50%乙醇本身无黏性，但是可润湿物料并诱发片中干浸膏本身的黏性，使能聚结成软材并制成颗粒。经过三批样品的制备，证实了该成型工艺合理可行。经过辛弗林含量测定方法学的考察，证实该含量测定方法准确、灵敏、重现性好，适用于测定心脉康片中辛弗林的含量，可以更好地控制该制剂的质量。

笔者对心脉康片辛弗林含量测定的流动相中的磷酸二氢钾水溶液配制方法进行考察，《中国药典》2010年版的配制方法为：取磷酸二氢钾0.6 g，十二烷基磺酸钠1.0 g，冰醋酸1 mL，加水溶解并稀释至1000 mL[7]，所配制得到的溶液气泡非常多，经过加热或超声处理后依然不减少，与甲醇以（50∶50）混合配制得到溶液，经微孔滤膜法抽滤后气泡仍然比较多，以此配制得到的流动相使色谱柱的压力增大，影响色谱柱的使用寿命。后来笔者把十二烷基磺酸钠的用量调整为0.5 g，也就是磷酸二氢钾水溶液配制方法为：取磷酸二氢钾0.6 g，十二烷基磺酸钠0.5 g，冰醋酸1 mL，加水溶解并稀释至1000 mL，配制得到的溶液气泡比较少，与甲醇以（50∶50）配制得到的混合溶液，经微孔滤膜法抽滤后几乎没有气泡，作为流动相时，色谱柱的压力平稳，而且色谱效果比较好。

动脉粥样硬化是以血管中层内膜厚度增厚、粥样斑块形成为主要表现的波及全身大、中型弹力型血管的系统性疾病[8]；是一类由遗传、环境因素及其之间的相互作用引起的多基因疾病[9]。动脉粥样硬化血栓形成是人类沉寂的杀手。血液在动脉内凝固是引发心肌局部缺血、冠心脏、中风的一个重要因素，现全球28%的死亡率归结于动脉粥样硬化血栓所导致，而且呈不断上升趋势[10]，多见于40岁以上男性及绝经期女性，以脑力劳动者较多见，对人们健康危害甚大。因此具有软坚散结，化痰通络功效的医院制剂心脉康片成功研发，可为广大心血管患者，特别是痰浊瘀血互结型的动脉粥样硬化的患者带来新的疗效好、价格便宜、质量可靠的药品；并有利于我国中医药事业的发展，具有重大的社会和经济意义，推广和应用前景广阔。

[1]李斐媛，叶小汉.从积聚内生论治动脉粥样硬化[J].广州中医药大学学报，2010，27（6）：633-635.

[2]余沛扬，许献文.软坚散结法治疗脑动脉硬化症的临床观察[J].当代医学，2011，17（18）：157.

[3]邓志刚，陈静，叶小汉，等.软坚散结方对颈动脉粥样硬化治疗的临床观察[J].中医临床研究，2012，4（10）：19-20.

[4]邓志刚，陈静，叶小汉，等.心脉康对颈动脉硬化患者高敏C反应蛋白及临床事件的影响[J].中国医药指南，2012，10（15）：601-602.

[5]柯颖川，吴谋，陈继英.心脉康片质量标准的研究[J].科技创新导报，2010，（34）：226-227.

[6]狄留庆，刘汉清.中药药剂学[M].北京：化学工业出版社，2011：170.

[7]国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：230.

[8]赵杰，张明辉，杨玉斌，等.老年高血压患者动脉粥样硬化差异的比较及可能的危险因素分析[J].中国社区医师：医学专业，2012，14（8）：16-17.

[9]Roy H，Bhardwaj S，Herttuala YS.Molecular genetics of atheros clerosis[J].Hum Genet，2009，125（5-6）：467-491.

[10]赵明中.全球性动脉粥样硬化血栓病人健康调查启动——REACH调查研究以及提高居全球致死率榜首的动脉粥样硬化血栓疾病的认识[J].中国医药导刊，2004，6（3）：234.