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一起由解藻朊酸弧菌引起食物中毒的病原菌检验分析

2013-06-19熊海平许海燕

交通医学 2013年1期
关键词:弧菌琼脂菌落

熊海平,许海燕,苏 婧

(南通市疾病预防控制中心,江苏226007)

2012年7月14日南通市开发区某社区发生一起食物中毒事件,29例患者共同就餐后因呕吐、腹痛、腹泻等症状入院治疗。经现场流行病学调查和临床资料分析,在排除化学性因素后,我们采集样品进行病原菌检验,结果从可疑剩余食品凉拌海蜇、鸭腿及患者肛拭子中分离到4株解藻朊酸弧菌,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 本起食物中毒事件因居民户举办丧事聚餐所致,约1 000人参加聚餐。首例病例于7月14日14:00开始发病,出现恶心、呕吐6次,为胃内容物,腹痛、腹泻(6次/天)、洗肉水样便,伴发热37.5℃,临床诊断为急性胃肠炎。后陆续有类似临床症状的患者就诊,发病人数共29例,其中男11例,女18例,年龄分布:21~30岁2 例,31~40岁 2 例,41~50 岁6例,51~60岁12例,61~70岁5例,71~80岁1例,80岁以上1例。29例患者中出现腹泻、腹痛21例(72.41%)、恶心 14 例(48.28%)、呕吐 16 例(55.17%)、发热 6例(20.69%)。潜伏期 2~20小时,平均潜伏期14小时。患者经克林霉素、依替沙星、西咪替丁等抗菌、补液对症治疗后全部痊愈,无重症病例。

1.2 方法 (1)样品采集:用肛拭子采集3例患者便样(未经抗生素治疗),可疑剩余食品凉拌海蜇、卤鸭腿各1份,共5份标本送实验室行病原菌分离鉴定。(2)检验试剂:增菌及分离鉴定用干燥培养基(北京陆桥技术有限责任公司);诊断血清(宁波天润药业有限公司);BD革兰氏阴性细菌鉴定/药敏分析板(上海碧迪医疗器械公司)。(3)主要仪器设备:PhoenixTM100全自动细菌鉴定/药敏分析仪(美国BD公司)、普通光学显微镜(日本奥林巴斯公司)、隔水式电热恒温培养箱(上海精宏仪器设备公司)。(4)病原菌检测:参照中华人民共和国国家标准《食品微生物学检验》[1]、《预防医学微生物学及检验技术》[2]进行病原菌分离鉴定。将采集的标本分别接种血平板、营养琼脂平板、麦康凯、SS、TCBS琼脂平板。嗜盐菌选择性琼脂及碱性琼脂平板置37℃培养24小时,同时经SC增菌液、GN增菌液、7.5%NaCl结晶紫增菌液及碱性蛋白胨水增菌后,分别转种上述平板置37℃培养24小时。挑取可疑菌落接种克氏双糖铁和3.5%NaCl三糖铁琼脂后,37℃培养24小时。根据实验结果行血清学试验和嗜盐性试验,继而接种革兰阴性细菌鉴定∕药敏分析板,用全自动细菌鉴定∕药敏分析仪行生化试验和药敏试验。

2 结 果

2.1 病原菌的增菌和分离 将5份标本进行增菌、分离培养,其中可疑食物2份和患者肛拭子2份标本,在嗜盐菌选择性平板等培养基上观察到相似可疑菌落。血平板、麦康凯、SS、碱性琼脂等平板上未见相应可疑菌落。血清学试验显示:可疑菌落与霍乱弧菌O1群、O139群等诊断血清均不发生凝集。

2.2 形态学特征 在嗜盐菌选择性平板上可见无色半透明、中等大小、圆形、光滑的菌落。在TCBS平板上可见黄色、光滑湿润、边缘整齐、较扁平、直径2~3mm大小的菌落。染色镜检为革兰阴性微弯曲弧菌,部分呈短杆状,无芽胞,无荚膜。

2.3 生化试验 可疑菌落接种3.5%NaCl三糖铁琼脂后,经37℃培养24小时。底层变黄、斜面变红、不产气、不产H2S,动力、氧化酶试验均为阳性。全自动细菌鉴定∕药敏分析仪显示:在4份标本中检出解藻朊酸弧菌,id%在 98.7%~99.5%间,其主要生化试验及嗜盐性试验结果见表1。

表1 可疑菌落的生化试验结果

2.4 药敏试验 分离鉴定解藻朊酸弧菌4株药敏试验一致,结果见表2。

表2 解藻朊酸弧菌4株药敏试验结果

3 讨 论

解藻朊酸弧菌为嗜盐嗜温、兼性厌氧的海生弧菌,广泛存在于海水及海产品中,可通过食用海产品而引起人类腹泻[3-4]。我市地处沿海,海产品丰富,食品极易因操作不当而受到致病性弧菌的污染,从而导致食物中毒的发生。本起食物中毒事件在可疑剩余食物和患者肛拭子标本中同时检出解藻朊酸弧菌,且分离到的菌株药敏试验结果一致。因此根据实验室检验结果结合临床资料及现场流行病学调查,可判定此次食物中毒事件系患者食用被解藻朊酸弧菌污染的食物所致。

就致病性弧菌引起的食物中毒而言,副溶血性弧菌等所致的食物中毒一直得到人们的关注,而解藻朊酸弧菌等致病性弧菌因致病力等因素不为人们所重视。本起食物中毒事件的病原学检测表明,应高度重视副溶血性弧菌以外的致病性弧菌所致疾病的调查研究。药敏试验的结果显示,分离鉴定解藻朊酸弧菌4株对氨苄西林等不少抗生素存在耐药现象。提示诊疗机构在治疗类似事件的患者时要重视病原菌的药敏试验,合理使用抗生素。

本市农村及城郊结合部个人承办婚丧宴席的现象较多,本起食物中毒事件就是由个人承办丧宴引起。由于食品加工人员的卫生意识淡薄,加工、储存条件简陋,极易造成食品受到病原菌污染,从而引发食物中毒事件。提示我们要注重加强农村及城郊结合部人员的卫生知识宣传教育,加强对个人承办宴席的监督管理。

[1]中华人民共和国国家标准.食品微生物学检验[S].北京:人民卫生出版社,2012:69-83.

[2]王秀茹.预防医学微生物学及检验技术[M].北京:人民卫生出版社,2002:349-353.

[3]付宝庆,刘青华,常纪,等.从多发性骨髓瘤患者痰中分离出1株解藻朊酸弧菌[J].中国感染与化疗杂志,2009,1(9):73.

[4]弁晓明,阿祥仁.腹腔引流液中分离出解藻朊酸孤菌一例报告[J].青海医学杂志,2010,40(3):55.

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