二联苯碘合并谷氨酰胺干预对过度训练引起的中性粒细胞功能的调控及机制研究*
2013-03-28董静梅陈佩杰
董静梅,陈佩杰
(1.同济大学体育教学部 上海200092;2.上海体育学院 上海200438)
过度训练(overtraining,OT)引起的运动性免疫抑制与过氧化损伤是影响运动员身体健康,困扰运动员提高运动水平的难点问题,谷氨酰胺(glu-tamine,Gln)作为细胞能量代谢的底物,可有效提高运动员的运动能力[1]。但一个不容忽视的问题是:运动本身可引起的活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生,而运动时Gln的补充在给予细胞能量的同时,又增加了体内组织细胞内源一氧化氮(nitric oxide,NO)的大量产生,这样活性氧、活性氮的双重因素可引起细胞的氧化损伤而导致细胞功能水平的下降[2],前期的研究证明:运动时NADPH氧化酶是运动引起的细胞非特异免疫功能变化的调控靶点[3]。基于此,本研究首次采用NADPH氧化酶抑制剂DPI与Gln补充作为合并干预的手段,分析探讨过度训练及其单纯补充Gln与合并干预对机体氧化水平的影响及机制,以达到逆转过度训练引起的中性粒细胞过氧化损伤,为防护运动性免疫抑制的方法学提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试剂
四甲基乙二胺(TEMED),二硫苏糖醇(DTT),甘氨酸(G)购自美国Promega公司;蛋白Marker由中科院上海生物化学研究所监制;苯磺酸(BSA)十二烷基硫酸钠(SDS)三羟甲基氨基甲烷(Tris)均购自上海迪奥生物科技有限公司。谷氨酰胺(Gln)购自美国Sigma公司。一抗gp91phoxrabbit polyclonal IgG和P47phoxGoat polyclonal IgG及二抗rabbit polyclonal to Goat IgG-HRP、Goat polyclonal to Rabbit均购自美国Santa cruz公司;本实验所有血液指标试剂盒均购自碧云天生物科技有限公司;呼吸爆发和吞噬功能检测试剂盒购自德国Glycotope Biotechnology公司。
1.2 实验动物及分组
50只雄性 Wistar大鼠(体重 225±6.7g),适应性喂养一周后(环境温度20℃~25℃,每天光照时间保证12 h,自由饮食水)。……
