刘重斌,王 瑞,潘慧斌,丁启峰,陆峰彬

(1.湖州师范学院医学院生理与药理学教研室,浙江湖州313000,2.温州医学院基础医学院生理教研室,浙江温州 325035)

帕金森病(Parkinson'disease,PD)在病理上表现为黑质致密区多巴胺(dopamine,DA)神经元变性、丢失,胶质增生,胞浆内出现特征性嗜酸性包涵体即路易体(lewy bodies,LBs),而α-突触核蛋白 (α-synuclein,α-SYN)是LBs的主要成分[1-2]。PD 发病与氧化应激、线粒体功能障碍及α-SYN异常有关[3]。因此,减轻氧化应激损伤可作为药物作用靶点之一用于神经保护药物的筛选。一些天然的抗氧化剂如茶多酚(tea polyphenols)、姜黄素(curcumin)和白藜芦醇(resveratrol)的研究表明对 PD具有一定的保护作用[4-5]。番茄红素(lycopene,LP)是类胡萝卜素的一种,有极强的清除自由基能力,能预防和修复动脉粥样硬化、前列腺和胸腺癌等癌症带来的氧化应激损伤[6]。本研究旨在利用鱼藤酮诱导的帕金森病小鼠模型,探讨番茄红素对小鼠黑质致密区和纹状体神经元的保护作用及可能机制,为开发具有抗P D作用的天然药物提供初步实验依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

1.1.1 试剂 鱼藤酮(rotenone)和二甲基亚砜(DMSO)购自Sigma公司,玉米油购自山东鲁花集团有限公司,番茄红素购自ToxSoms公司,鼠α-SYN单克隆抗体、SABC免疫组织化学试剂盒购自武汉博士德公司,鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)单克隆抗体、兔微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 3 light chain,LC3-B)多克隆抗体购自碧云天生物技术公司,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)试剂盒购自南京建成生物工程有限公司。其余试剂均为国产市售分析纯。

1.1.2 仪器 SpectraMax M2酶标仪(Molecular Devices公司);WMT-200水迷路视频分析系统(成都泰盟科技有限公司)。……