高 峰，陈世玖，张丽杰，倪少俊，杨 军，李 智

(遵义医学院第五附属(珠海)医院手外、整形科，广东珠海519100)

指甲再生来源于甲根和甲弧影下方的甲床，此处的甲床称为甲母质。甲床提供指甲向远端生长的滑面，当甲床受损后，新生的指甲会出现不整齐现象而影响美观。因此，临床工作者们不懈地努力研究，不同类型的甲床损伤采用何种方式修复，术后能达到理想的效果。随着显微技术的发展，可根据情况选择不同的方法，完善了甲床损伤的治疗，如游离甲床移植术、皮瓣修复术、游离甲瓣修复术等。近些年，对甲床基础的研究相对较少，本实验旨在为深入研究甲床细胞奠定基础。

1 材料与方法

1.1 甲床上皮细胞组织块

培养 收集一名临床志愿者因经专科医师检查及超声波检查后发现胎儿死在宫内，进行立即引产，取得胎儿手指(经本人和家属知情同意)。将20周以上胎儿手指放入70%乙醇中浸泡5 min，取出后用磷酸盐缓冲液冲洗3遍。超净工作台内4倍手术放大镜下，切取甲床，放入含双抗的磷酸盐缓冲液中备用。将切取的甲床组织在培养皿内用眼科剪将其剪切成1 mm2的小块，均匀地平铺于25 cm2培养瓶底部，组织块与组织块之间保持0.5 cm左右的距离，加入无血清角化细胞培养基，于37℃ CO2培养箱中倒置培养3～4 h，待组织块黏着牢固时，加入0.001～0.002 L培养液，然后翻转培养瓶，使培养液慢慢浸润组织块，再轻轻且缓慢翻转正置培养瓶，使培养基刚好浸过组织块平面，以不令组织块漂起为标准。……