孙亦群

（广州中医药大学第一临床医学院，广州510405）

在医药学科研实践中，常会用到高血压动物模型。若直接购买，其价格十分昂贵（如一只高血压大鼠模型约需200元）。在经费有限的情况下，往往需要自己动手。学生们一般是在《药理实验方法学》中可找到造模方法，但书中的方法不够具体，许多细节需要在实践中摸索出来，致使成功率较低。本文就是在无数次的实验、失败中，总结出一些经验，与大家（尤其是研究生们）分享，以提高造模成功率，节省科研经费，提高科研效率。

肾性高血压模型即直接对肾或肾血管实施手术，造成实验动物血压升高。其发病机制与肾缺血导致的肾素-血管紧张素系统激活等有关。可分为两类：肾血管性高血压模型和肾外包扎性高血压模型。肾血管性高血压模型又可分为：2肾1夹型、1肾1夹型、2肾2夹型。常用的高血压动物模型有狗、兔或大鼠等。由于实验大鼠的价格低，易得，所以较常用。本文仅介绍二肾一夹型高血压大鼠模型的造模方法与技巧。

1 动物、药品、设备及手术器具

1.1 动物 清洁级 SD大鼠，体重 100～120g，由广州中医药大学实验动物中心提供。

1.2 药品 安定、氯胺酮、戊巴比妥钠、水合氯醛、生理盐水、碘酒、酒精。

1.3 设备及手术器具 BP-6A型全自动无创血压测量系统（成都泰盟科技有限公司）；固定板或垫、绵绳、注射器，手术直剪及弯剪，手术刀，止血钳，棉球，纱布，眼科镊子，玻璃分针，U形银夹，缝合针、线。

2 操作步骤[1]

2.1 麻醉 取大鼠，以安定5mg/kg+氯胺酮50mg/kg（或1%戊巴比妥钠10ml/kg；10%水合氯醛 0.3ml/kg），ip麻醉。

2.2 固定 将已麻醉的大鼠仰卧位置于固定板或垫上，以绵绳分别拴住大鼠4只爪，另一绵绳勾住大鼠上齿，绵绳另一头分别栓在固定板四角及顶部的钉子上。见图1。

2.3 切口 剪去腹部手术野的毛，以碘酒及酒精消毒，于剑突下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，以止血钳夹住切口两边的肌层，拉开切口。

2.4 找出肾脏 右手食指伸入腹腔摸着肾脏，左手指从腹部外侧配合将肾脏轻轻挤出，用浸有生理盐水的棉球或纱布包住，用左手食指与拇指将其固定。

2.5 分离肾动脉 以眼科镊子小心分离肾蒂部筋膜，以玻璃分针（见图 2）沿肾静脉下方分离肾动脉，在近主动脉端用U型银夹（内径为0.2～0.25mm）套上，用镊子夹紧银夹口部。

2.6 缝合 以手术专用的缝合针、线，缝合手术切口。

2.7 血压测量 用 BP-6A型全自动无创血压测量系统测量血压。术后大鼠血压逐渐升高，4～5周后70%以上大鼠形成持续性高血压，收缩压大于160mmHg（或较之于基础血压升高大于30 mmHg）者，视为造模成功。

图1 固定大鼠

图2 玻璃分针

3 注意事项

3.1 关于麻醉剂的剂量 若手术时间较长，可追加 1/4剂量。如选择10%水合氯醛作为麻醉剂，操作时要注意，带乳胶手套，并护住手臂，面部远离麻醉剂瓶口。因水合氯醛具挥发性及腐蚀性，若其挥发气体附着于皮肤上，会引起皮肤瘙痒，进而脱皮。

3.2 关于玻璃分针 大鼠肾动脉血管很细小，并与肾静脉黏连一处，需要将其分开。由于眼科镊子头部带齿，操作需十分小心，否则很易创伤血管及周围器官。而玻璃分针较为光滑，头部拉成细小的弯勾，既便于分离大鼠肾动脉血管，又不会造成创伤。玻璃分针可以自制，取长 10～12cm，直径 0.3～0.5cm的玻璃棒，在酒精喷灯上加热一端，戴玻璃软化后，以镊子拉成细线，再弯出小弯勾，既得。

3.3 无菌操作 所有手术器具均需消毒灭菌。将手术器具清洗干净，用消毒巾包裹，于压力灭菌器中，121℃，0.15MPa，灭菌30min或于电烤箱中180℃，灭菌120min。所带手套以酒精消毒，手术过程需无菌操作，动作要轻，要十分细心。术后，刀口处每天要消毒，防止污染而引起发炎。必要时可给以一定剂量的抗生素。

3.4 关于基础血压 由于测量大鼠血压的设备不同，测定结果也存在较大差异，所以使用血压升高大于 30 mmHg为造模成功的方法，可消除误差。这就需要在造模前，先测定每只大鼠的基础血压。测量大鼠血压时，环境很重要。需要安静、避光，以使大鼠能安静，不烦躁乱动，才可测出真实、可靠的血压值。

[1]徐淑云.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:950.