陈桂光，李文杰，黄梅华，田 苗，张云开，梁智群

（广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530004）

血栓性疾病严重危害人类的健康和生命，根据WHO（世界卫生组织）统计的数据，目前血栓性疾病有向低龄化发展的趋势[1-2]。近年来，作为新一代溶栓药物的纤溶酶引起了国内外研究者的广泛兴趣，从溶栓作用机理上微生物来源的溶栓剂可以分为两类：一类是纤溶酶原激活剂；另一类是纤溶酶类物质，如纳豆激酶（NK）、天然来源的纤溶酶等[3-4]。国内外在抗血栓药物方面的研究，正趋向于低价高效、易吸收、体内半衰期长的方向发展[5]。据报道，注射用纤溶酶是集选择性适度，半衰期长，抗抑制，效力高，无毒副作用于一体的理想溶栓剂[6]。目前，国内外对纤溶酶的液体发酵工艺研究较普遍，但同时对一株产纤溶酶菌株的固、液体发酵工艺的研究较少。本文对实验室保藏的产纤溶酶海洋枯草芽孢杆菌LJ-22的固、液体发酵工艺进行了研究，为工业化大规模生产提供了理论基础和实践条件，同时也初步论证了扩大化液体发酵的可行性。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

海洋枯草芽孢杆菌（marine Bacillus subtilis）LJ-22 广西大学生命科学与技术学院食品研究所保存；牛血纤维蛋白原、Ampicillin 美国Sigma公司；凝血酶、尿激酶 中国药品生物制品检定所；琼脂糖GENE TECH COMPANY LIMITED；其他试剂 均为国产分析纯或进口分装；种子培养基（%） 葡萄糖0.5、酵母膏0.5、蛋白胨1.0、NaCl 0.5，pH7.0～7.2；液体基础发酵培养基（%） 可溶性淀粉5、蛋白胨2、K2HPO40.3、KH2PO40.1、Mg·7H2O 0.3、CaCl20.02，pH7.0；液体发酵培养基（%） 玉米淀粉4、玉米浆干粉2、K2HPO40.3、KH2PO40.1、Mg·7H2O 0.3、CaCl20.02，pH7.0；固体发酵培养基 豆粕粉∶玉米粉（w/w）为1∶1，按1∶1（v/w）加纯水混匀，pH7.0。……