朱长波 王劲松 陈清蝉

(1.武汉烁森生物科技有限公司，湖北荆门 448121；2.荆楚理工学院，湖北荆门 448000)

我国每年产生数亿吨的各类糟粕，一方面没能很好的利用造成巨大浪费，另一方面又从国外进口大量大豆。我们将啤酒糟、白酒糟、味精糟、糖糟等农副产品及工业废料作为主要原料，以其他农副产品为辅助原料，加上我们的核心菌种，采用现代生物工程技术和酶工程技术，结合微生态理论，通过多菌种混合固体发酵和添加外源复合酶相结合的先进工艺，生产植物源性酶菌功能营养小肽——肽素35。

过去我们只能用单一的凝胶电泳的检测方法,只能单一的判断小分子肽分子量的范围,不能准确的判断各个分子量段的含量,从而不能准确的判断我们的发酵产品和别人的产品的差异。为了建立一种科学、可靠和稳定的检测方法,我们花了10年时间，通过大量的方法实验证明,Shodex尺寸排阻色谱法是一套比较科学的检测方法,该方法对确定小分子肽含量的测定准确、可靠。

1 待检测原料肽素35的原料组成及比例（见表1）

表1 肽素35的组成(%)

2 小分子肽的分离提取

2.1 蛋白质提取

肽素35样品粉碎，过0．25 mm的筛网，取100 g溶解在水中，定容到1 000 ml，在50℃的振荡水浴锅中振荡提取15 h，得固液混合物。

2.2 蛋白质溶液除杂

提取结束的固液混合物先用纱布粗过滤一次，然后用滤纸细过滤一次，离心（转速4 000 r/min，20 min）再次除去部分固型杂质。取出上清液体放入冰箱待盐析。

2.3 盐析

取800 ml样品蛋白质溶液，称取440 g硫酸铵，逐渐加入到蛋白质溶液中，边加边搅拌。……