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趋化因子CXCL5启动子区-156G/C基因多态性与2型糖尿病的关系

2012-11-28赵艳茹齐曦明尹福在

天津医药 2012年12期
关键词:糖尿病研究

赵艳茹 刘 波 齐曦明 尹福在

胰岛素抵抗是2型糖尿病(T2DM)的核心机制,有研究证实胰岛素抵抗与慢性低水平的炎症状态和一些细胞因子相关[1]。在T2DM发生发展中,炎症因子可能具有重要作用[2]。CXCL5/ENA-78即上皮细胞来源的中性粒细胞活化肽,是趋化因子超家族的CXC亚族成员,参与多种炎症反应。本研究旨在探讨CXCL5基因启动子区-156 G/C位点多态性与T2DM的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2009年2月—10月在我院内分泌科住院的T2DM患者210例为T2DM组,男女各105例,年龄(54.09±12.43)岁,体质量指数(BMI)为(25.38±3.67)kg/m2,诊断符合1999年WHO糖尿病诊断标准,排除伴有急慢性感染性疾病、严重心脑血管病变、肝肾功能不全及严重T2DM急性代谢并发症者。选取同期我院体检中心的健康体检者171例为对照组,男88例,女83例,年龄(52.64±11.46)岁,BMI为(25.16±3.48)kg/m2,2组间性别(χ2=0.283)、年龄(t=1.175)、BMI(t=0.601)比较差异无统计学意义(均 P>0.05)。

1.2 主要仪器试剂 PCR扩增仪Mastercycler T-Gradinet(德国Eppendorf公司),DYCZ-28A型电泳槽(北京市六一仪器厂),恒温孵育箱。人全血DNA提取试剂盒(北京天根生物有限公司),Taq-DNA聚合酶、NruⅠ限制性内切酶(Promega公司)。

1.3 研究方法 2组均采空腹外周静脉血2 mL,提取白细胞基因组DNA。采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测CXCL5基因启动子区-156 G/C基因多态性。引物序列均查基因库并参考文献[3]设计,上游引物5′-CTCCTCCTGGCCACCCTCGC-3′,下游引物 5′-TCAAGCTTTG GGATGCTGGGGAA-3′(上海捷瑞生物工程有限公司合成)。PCR扩增片段长度114 bp,分离纯化扩增产物,测序并与GenBank中CXCL5基因比较。以限制性内切酶NruⅠ进行消化,酶切产物用经15%聚丙烯酰胺电泳溴乙锭染色,凝胶自动成像系统观察结果并成像。

1.4 统计学方法 采用SPSS 11.5软件完成,计量资料用±s表示,两个样本比较采用t检验,偏态分布资料做自然对数转换成正态分布后再行t检验。遗……

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