周 亮，冷慧敏，2，翟庆娜，2，王 勇，孙 亮，李贤新，余振东，桂耀庭

（1.北京大学深圳医院 男性生殖与遗传重点实验室，广东 深圳518036；2.汕头大学医学院）

肾癌发生发展的分子生物学机制尚未完全清楚，探索肾癌的致病基因对于了解肾癌的发病机制有重要的意义。microRNAs（miRNAs）是普遍存在的、调节基因表达的短非编码（约22nt）小分子调节RNAs，是由具有发夹结构的70－90个碱基的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。1993年，miRNAs在秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegants）中首次被发现［1］，人类基因组中编码超过1000个miRNAs。其功能是调节特异性mRNA靶标活性，每一个miRNA可以抑制数百个mRNAs，在生理和病理过程中大范围内发挥重要作用［2］。目前的研究证实约一半的miRNAs其上游基因位于染色体中与肿瘤相关的区域内，肿瘤的发生发展与miRNAs之间存在着错综复杂的联系［3］。

本实验室前期应用第二代大规模平行测序技术对10例肾透明细胞癌及其癌旁组织的microRNAs进行全基因组测序后发现：miR－210表达差异显著，与其癌旁组织相比较平均上调约26倍。本研究应用荧光定量PCR技术比较miR－210在52例不同阶段的肾细胞癌及其癌旁组织中表达量的差异［4］，用统计学方法分析miR－210表达量的差异与肾癌病理分期、年龄及性别的关系，以求发现新的诊断指标和新的治疗肾癌的方法。

1 对象与方法

1.1 对象 收集北京大学深圳医院、深圳市人民医院、中山大学附属肿瘤医院泌尿外科等未经治疗的原发性肾细胞癌患者手术切除的癌及其相应癌旁组织标本52例。所有标本均有完整的临床病理资料，HE染色判定组织学类型，所有癌组织的相应癌旁组织为正常肾实质结构，无肿瘤细胞。……