郭晋伟，阴怀清，闫焕利，范泽卫，杜 洪

新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）为新生儿期常见疾病之一，是围生期窒息导致脑缺氧缺血性损害，引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因之一。缺氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor 1，HIF-1）是一种氧敏感转录激活因子［1］。以往研究显示，在轻度缺氧条件下，HIF-1诱导下游靶基因的表达，产生一系列缺氧适应性反应，达到神经保护作用［2］。但是，当神经细胞暴露于慢性或极度缺氧时，HIF-1α的大量表达却促进了细胞凋亡的发生。本研究通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）模型，观察HIF-1α表达与细胞凋亡的关系及2-甲氧基雌二醇（2ME2）干预后的影响，以期阐明抑制HIF-1α表达后对缺氧缺血性脑损伤的影响及可能的作用，从而为指导临床治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试剂与药品 一抗：兔抗鼠HIF-1α、caspase-3及二抗：即用型SABC试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒均购自武汉博士德生物技术有限公司。2-甲氧基雌二醇系美国Cayman公司提供，由于2ME2是脂溶性粉末物质，采用二甲基亚砜（DMSO）溶解后，用PBS稀释使有毒物质DMSO的浓度降为5%。

1.2 动物分组及模型制备 清洁级，封闭群，新生7d龄Wistar大鼠120只，雌雄不限，体重10g～15g，购自山西医科大学实验动物中心。采用完全随机设计将大鼠分为假手术组、缺氧缺血组及2ME2干预组。其中后两组又根据HIBD后处死动物的时间（HIBD后3h、6h、12h、1d、2d、3d、7d）随机分为7个亚组，每组各8只。假手术组给予麻醉后切开颈部皮肤，仅分离左侧颈总动脉，不结扎，不予缺氧处理；采用经典Rice法［3］制成HIBD动物模型；缺氧缺血组给予麻醉后切开颈部皮肤，分离结扎左侧颈总动脉后置于缺氧舱中（含8%氧气）2h制作HIBD模型。……