毕保良，李进涛，刘汝文，陈丽玲，何保丽，李 波，角建林*

(1.云南农业大学动物科学技术学院，云南 昆明 650201;2.昆明医学院实验动物学部，云南 昆明 650500)

骨髓穿刺是使用穿刺针穿刺骨髓腔抽取骨髓的一种常用的医疗诊断技术，通过对骨髓的检查可对细胞学、细菌和寄生虫等疾病进行诊断或者提供诊断的线索及观察一些疾病的治疗效果[1]。但在实验动物方面，尤其是小型猪的骨髓穿刺主要是为了获得骨髓来分离骨髓干细胞供科学研究用。小型猪作为动物模型的优点在于它在解剖学和生理学等接近于人的生理机能和生化代谢等方面。小型猪作为动物模型已在肿瘤、糖尿病、烧伤、畸形学、胃肠病学、皮肤病学、产期生物学、老年学、心血管、口腔等生物医学领域广泛应用。滇南小耳猪按体型可分为大、中、小三种类型，其中小型猪体型短小，头小，耳小，四肢短细，蹄小坚实，生长速度慢，饲料利用率低。国内对于小型滇南小耳猪的骨髓穿刺采集骨髓只是简单的叙述，未做详细的操作记录。因此，笔者对6头小型滇南小耳猪的髂骨穿刺进行了初步的探索，总结了具体的操作方法和技巧，为从事实验动物和动物实验的同行提供有益的参考。

1 材料与方法

1.1 材料

(1)实验动物。小型滇南小耳猪6头，来自于昆明医学院实验动物中心，年龄1.0～1.5岁，体重30～45 kg。

(2)饲养条件。普通环境饲养，全价猪颗粒饲料饲喂。

1.2 麻醉药

盐酸氯胺酮注射液(2mL:0.1 g/支)或者3%戊巴比妥钠注射液。

1.3 消毒用品

70%酒精，碘酒，无菌棉签。

1.4 所用器具和试剂

16号胸骨穿刺针，无菌注射器，肝素钠注射液，无菌脱脂棉球，口罩，帽子，手套，剃毛刀，肥皂，清水及生理盐水。

1.5 穿刺方法及步骤

(1)禁食、禁水。穿刺前12 h禁食、2 h禁水，以防麻醉时引起胃内容物返流堵塞呼吸道。

(2)保定。盐酸氯胺酮注射液按每千克体重4～6 mg肌肉注射或者3%戊巴比妥钠注射液按每千克体重30 mg静脉注射。

(3)体位选择。取侧卧位，保持猪脊椎与手术台垂直。(4)穿刺部位。距髂骨翼边缘1 cm稍平凹处，即髂骨翼边缘向后约1 cm。

(5)剪毛。以距髂骨翼边缘1 cm处穿刺点为中心，将直径为5 cm圆形范围内用剃毛刀将毛除去。

(6)清洗消毒。先用肥皂水清洗1次，然后用清水冲洗1次;再按常规先后用碘酒、70%酒精各消毒3次，穿刺者应戴好无菌手套、口罩、帽子。

(7)用无菌注射器抽取适量的肝素钠注射液(一般为1～2mL)。

(8)进针。选用已灭菌的16号胸骨穿刺针，操作者左手将穿针点周围的皮肤绷紧，右手持穿刺针在穿刺点垂直进针穿透皮肤至髂骨翼时，穿刺针稍微倾斜约成30度角轻轻左右旋转将穿刺针穿入髂骨内，进针大约0.5 cm深度时，有轻微突破感。拔出针芯，用装有肝素钠的无菌注射器迅速抽出骨髓液，若抽不出骨髓液，插上针芯左右旋转将穿刺针穿入髂骨内直至抽出骨髓为止。

(9)插上针芯，取出穿刺针，用无菌棉球压在穿刺点上1～3min，再用70%酒精进行消毒，同时用适量的青霉素稀释液沿穿刺方向刺入后边退针边注射。

1.6 穿刺后的护理

将猪平放于饲养圈舍或不锈钢饲养笼，并观察生命体征有无异常，若无异常，方可离开。

2 讨论

(1)滇南小耳猪的髂骨穿刺是否成功的关键在于能否准确判断髂骨的解剖结构[2－3]。髂骨为三角形的扁骨，前部边缘称为髂骨嵴，前部较宽大称为髂骨翼，后部狭小称为髂骨体，具体为下面的解剖图。

图1 解剖图

从图1可知，最佳穿刺的部位是两个三角形区域范围内，因为两个三角形的区域范围内骨质相对较为疏松，穿刺针穿刺的阻力相对较小，穿刺容易成功。但由于小三角形区域难于准确定位，常采用的穿刺位置为大三角形区域范围内。大三角形区域是依据髂骨边缘(1.0～1.5 cm)和髋结节(1.5～2.0 cm)来准确定位。

(2)穿刺部位确定后，胸骨穿刺针穿刺皮肤时应垂直进针，当针抵达髂骨骨膜时针尖与髂骨翼成30°～45°角旋转进针，不然易折断穿刺针。抽取骨髓时要有耐心，如无骨髓抽出时插入针芯左右旋转进针或退针，以尽量抽到所需的骨髓量。

(3)麻醉药的使用及注意事项。盐酸氯胺酮和戊巴比妥钠都属于非吸入麻醉药，这类麻醉药具有操作简便、麻醉快、兴奋期短等优点。但盐酸氯胺酮麻醉维持时间短(一般为15～20min)，有引起唾液分泌增多，呕吐，血压、颅压及眼压升高等不良反应。因此，在实际的临床麻醉中，先按说明书算出盐酸氯胺酮总麻醉需要量，注入总量的2/3时仔细观察，如果已达到所需的麻醉效果，剩余的量就不必要再注射。也可配合小剂量的阿托品使用以抑制腺体的分泌[4]。使用戊巴比妥钠时应注意避免“葡萄糖效应”，即戊巴比妥钠麻醉手术后注射葡萄糖，可导致重新进入麻醉或休克而致死。因此，使用戊巴比妥钠麻醉动物后禁注葡萄糖。

麻醉药的使用剂量应考虑麻醉药在动物机体内的代谢率及动物的年龄、性别、体质和麻醉史等。因此，麻醉药的使用剂量应视个体动物的具体情况来定。

(4)局部麻醉药的使用。穿刺时如猪疼痛反应比较强烈时，一定要考虑使用局部麻醉药如盐酸普鲁卡因或盐酸利多卡因，以免过度的疼痛应激引起意外发生[5]。局部麻醉药的注射应尽量选择分2～4个点注射，以给穿刺针穿入皮下后有前后移动的余地。局部麻醉药注射后用灭菌纱布按住注射部位按摩30～60 s，这样局麻的效果会更好。

(5)麻醉前必须禁食12 h、禁水2 h。一旦发生呕吐，应尽可能排出口腔内的呕吐物，呕吐停止后用止血钳夹住高压灭菌的棉球清洗口腔。在整个麻醉期间还应注意实验猪的舌部情况，一旦发现舌回缩，要立即用手或止血钳将舌牵出口腔外，以保证呼吸的畅通。

(6)使用抗生素，防止继发感染。同一头实验猪有可能进行多次骨髓抽取手术，如重复次数多有可能引起继发感染。所以每次穿刺抽取骨髓后沿穿刺的方向注射一定量的青霉素，防止继发感染。此外，还要做好手术室的清洁卫生和消毒工作。

(7)麻醉穿刺后的护理是非常必要的。在穿刺完成后麻醉未醒之前，应有专人实时观察实验猪的体温和呼吸等变化。实验猪应平躺着睡，保证呼吸顺畅;苏醒后应辅助站立，避免撞伤;从麻醉开始直至实验猪苏醒之前的保暖措施要到位，防止受凉;在吞咽功能尚未完全恢复时，禁止饲喂和饮水。

(8)在麻醉前准备好麻醉中毒的抢救药品。如呼吸兴奋药戊四氮、尼可刹米、美解眠等。强心药如肾上腺素、咖啡因、安钠咖、阿托品等。

[1]郑潇潇，郑维扬，江千里，等.“五字诀”优化骨髓穿刺培训体系[J].南京医科大学学报(社会科学版)，2010(1):81－84.

[2]马燕，倪俊学.小婴儿胸骨骨髓穿刺临床体会(附32例报告)[J].中国医疗前沿，2008，3(22):66.

[3]张军.骨髓穿刺200例临床分析[J].实用医技杂志，2009，16(6):479 －480.

[4]高国峰，王海涛，姚继红.氯胺酮肌肉注射镇痛在小儿骨髓穿刺术中的应用[J].实用医药杂志，2009，26(1):36－37.

[5]程荣先.骨髓穿刺涂片的方法与技巧体会[J].中国误诊学杂志，2008，8(17):4091 －4092.