张曙光 何 跃 项 杰 马林昆 李 燕 袁援生

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)最常见的眼部并发症，是DM患者致盲的主要原因之一。多年来，国内外对DR的研究主要集中在视网膜毛细血管微循环的改变上，对视网膜神经组织的研究较少。事实上，视网膜是由血管和神经元组成的复杂结构，主要由神经网膜组成，神经细胞是神经网膜的主要成分，血管组织仅占很少一部分。20世纪80年代中期已有学者提出DR的主要发病机理可能不仅是视网膜血管本身，还与血管周围的神经元或神经胶质组织相关，且关系更为密切。因此，神经网膜的研究对早期DR的预防及减少其并发症的发生具有重要价值，阻断并减少早期视网膜神经细胞的凋亡，研究其在DR中的凋亡机制，对疾病的认识和早期治疗具有重要意义。JNK是丝裂原活化蛋白激酶家族成员，它是参与凋亡过程的重要基因之一[1-3]，其在DM中的作用也日益受到关注。本实验通过观察JNK2在DM早期视网膜中的表达变化及其对神经节细胞凋亡的影响，初步探讨JNK2在糖尿病视网膜中的作用及与神经节细胞凋亡的关系，为进一步了解DM早期视网膜组织的变化奠定基础，从而为预防早期DR的发生及治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 链脲佐菌素(美国Sigma公司)，柠檬酸、柠檬酸钠、雅培安妥超越血糖试纸(美国GBI公司)，Trizol(美国Trireagent公司)，cDNA合成试剂盒(美国Fermentas公司)，2×PCR master mix(美国Fermentas公司)，TBE Buffer、琼脂糖、基因表达试剂盒(美国ABI公司)，Taqman基因表达预混试剂盒 (美国ABI公司)，GAPDH、JNK2引物(上海生工)，DNA Loading buffer(美国 Fermentas公司)，凋亡试剂盒(Millipore公司)，蛋白酶K(大连宝生物工程公司)。……