单味中药抗大肠杆菌内毒素的实验研究
2012-11-09涂可斌余声文
湖北科技学院学报(医学版) 2012年1期
涂可斌,余声文
(1.咸宁市咸安区妇幼保健院,湖北咸宁437000;2.湖北省中医院)
内毒素是细胞壁外膜结构中的脂多糖,能引起发热、休克、器官损伤等多种病理变化和各种并发症。中医中内毒素是“毒”邪的一个重要组成部分,是引起卫气营血及其传变的一个重要病因。因而,如果利用中医辨证施治,复方用药特长,对内毒素引起的多方面病理损害进行多靶点的防治将具有重要临床意义。我们采用琼脂二倍稀释法进行体外抗菌实验研究,以寻找有效抗大肠杆菌内毒素的单味中药。
1 材料与方法
1.1 药材提取
所用玻璃仪器洗液浸泡1夜,常水洗净,蒸馏水冲洗3遍,烤箱烤干,然后250℃干热灭菌2h备用。生大黄、蒲公英、茵陈、赤芍、金银花、虎杖、黄连、连翘、黄答、丹参、甘草、桅子、积实、白头翁、败酱草、柴胡(购于药店)分别用适量甲醇冲洗,然后用适量甲醇浸泡1h,超声30min,过滤;加入甲醇,再超声30min,过滤,合并2次滤液,回收甲醇。用肉汤溶解残渣,并定容至试验所需浓度。
1.2 细菌培养
取冻干大肠杆菌ATCC25922安培1支用2ml无菌肉汤溶解,取1环接种于固体培训基地中,37℃培养16~18h。然后,取1个菌落溶于2ml肉汤中,37℃培养6h,取0.1ml溶于100ml肉汤中备用。
1.3 不同中药抗菌试验
用二倍稀释法对各种中药提取液分别进行2倍稀释,然后在不同浓度药材提取物试管中加入等体积热液体琼脂培养基,混匀并斜放,待凝固后在每支试管中划线接种大肠杆菌1环,37℃培养24h,以细菌生长的状况作为判断指标,观察抗菌作用结果。接种区光滑无可见菌落为具抗菌作用;接种区可见大片细菌生长为无抗菌作用。……
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