HPLC法测定胆酸止咳片中胆酸的含量

2012-11-01李成网

亚太传统医药 2012年1期

关键词：方法

张洁，白娟，李成网

（安徽省医学科学研究院，安徽合肥 230061）

胆酸止咳片是一种由粗胆酸、陈皮、甘草等中药组成的传统中药制剂，临床使用已有多年的历史，具有止咳化痰之功效，用于治感冒引起的咳嗽，疗效显著。关于胆酸的含量测定报道较少［1-3］，且多是用比色法，操作复杂，误差较大。现采用HPLC法测定胆酸含量，简便、快速、重现性好，可作为胆酸止咳片的定量分析方法，报道如下。

1 仪器与试药

Waters 600高效液相色谱仪；UV996紫外检测器；AD-2型百万分之一电子天平；BP210S型万分之一电子天平；AS3120型超声波清洗器；胆酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100078-200414）；甲醇（色谱纯）；水（重蒸水）；其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

采用反向高效液相法测定本品中的胆酸含量［4，5］。色谱柱：Shim Pack CLC ODS C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水-磷酸（38：62：0.1）；检测波长：208nm；柱温：25℃；流速：1.0mL×min-1；进样量：20μL。在此条件下进行样品分析，供试品溶液中的胆酸与其他杂质峰分离良好，保留时间在25min左右，分离度大于1.5。

2.2 线性范围考察

精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成4.105mg／mL的对照品溶液，分别精密吸取1.25、2.50、5.00、7.50mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。依法测定，峰面积积分值分别为：84466、166931、343615、506738、691137。以胆酸峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标，得回归方程为 Y＝168277X-4080.6，r＝0.9998。结果表明，胆酸浓度在0.513～4.105mg／mL范围内与峰面积之间呈良好线性关系。