食品中单核细胞增生李斯特菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立
2012-10-27徐义刚崔丽春李丹丹刘忠梅李苏龙张子群张国财
徐义刚,崔丽春,李丹丹,刘忠梅,李苏龙,张子群,张国财,*
(1.黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,黑龙江 哈尔滨 150001;2.东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨150040;3.海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,海南 海口 570125)
食品中单核细胞增生李斯特菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立
徐义刚1,崔丽春2,李丹丹3,刘忠梅1,李苏龙1,张子群1,张国财2,*
(1.黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心,黑龙江 哈尔滨 150001;2.东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨150040;3.海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,海南 海口 570125)
基于单核细胞增生李斯特菌胞壁质水解酶iap基因,设计两对特异性引物,利用DNA环介导恒温扩增(loopmediated isothermal amplification,LAMP)技术,以扩增副产物焦磷酸镁实时浊度为判定标准,建立食品中单核细胞增生李斯特菌LAMP快速检测方法。结果显示,本LAMP方法特异性强,经过对29株细菌进行检测,所试单核细胞增生李斯特菌均为LAMP阳性,其他菌株为阴性;本LAMP方法对单核细胞增生李斯特菌纯培养菌的检测灵敏度为8CFU/管,对污染食品中单核细胞增生李斯特菌的检测灵敏度为12CFU/管。本研究建立的LAMP检测方法简便快速、结果判断直观。
单核细胞增生李斯特菌;iap基因;环介导恒温扩增;快速检测
李斯特菌属(Listeria)有2个群共7个种,第1群包括单核细胞增生李斯特菌(L. monocytogenes)、绵羊李斯特菌(L. ivanovii)、英诺克李斯特菌(L. innocua)、威尔斯李斯特菌(L. welshimei)、西尔李斯特菌(L. seeligeri);第2群为较少见的格氏李斯特菌(L. grayi)和莫氏李斯特菌(L. murrayi)[1]。其中,单核细胞增生李斯特菌是唯一能引起人类疾病的一种重要的人畜共患病和食源性疾病的致病菌,在自然界中广泛存在。……
