张观坡 高 峻 李桂香 李兆申 邹多武*

第二军医大学长海医院消化内科（200433）

肠缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）损伤是临床上较为常见的基本病理生理过程，可在出血性休克、小肠移植、机械性肠梗阻和严重外伤等过程中发生[1]，会引起严重的并发症甚至死亡，但目前仍缺乏有效的治疗药物。硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）是一种继一氧化氮和一氧化碳之后的第三类气体信号分子，包括人在内的哺乳动物可代谢生成内源性H2S。Liu等[2]和Henderson等[3]均证实肠缺血后再灌注前给予H2S，可减轻I/R对肠黏膜上皮的损伤。目前尚未见H2S能否保护I/R后肠运动功能的报道。本研究通过探讨H2S对肠I/R后回肠收缩活性的影响及其机制，旨在为肠I/R的治疗提供一种潜在的药物。

材料与方法

一、实验动物、主要仪器、试剂

24只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠由第二军医大学实验动物中心提供，体质量180～250 g，适应性饲养1周。

BL-420S生物机能实验系统、HV-4离体组织器官恒温灌流系统、普通刺激银电极（成都泰盟软件有限公司），JH-2肌张力传感器（航天医学工程研究所），IX71 荧光倒置显微镜（Olympus公司）。KCl（上海凌峰化学试剂有限公司），乙酰胆碱（Ach）、硫氢化钠（NaHS）、河豚毒素（TTX）（Sigma 公司），驴封闭血清（Invitrogen公司），小鼠抗Hu单克隆抗体（Molecular Probes），山羊抗胆碱乙酰转移酶（ChAT）多克隆抗体（Millipore），488 标记的驴抗小鼠荧光二抗（Invitrogen公司），Cy3标记的驴抗山羊荧光二抗（Jackson ImmunoResearch）。

二、方法

1.肠I1h/R4h模型的制备：SD大鼠禁食不禁水18 h，7%水合氯醛腹腔内注射麻醉，开腹分离肠系膜上动脉并用无创动脉夹夹闭，可见肠系膜上动脉分支远端搏动消失，小肠由红色转变为白色渐而转变为深蓝色。……