杨 静 于岩波 于 卉 左秀丽 陈哲宇 李延青#

山东省千佛山医院消化内科1（250014） 山东大学齐鲁医院消化内科2 山东大学医学院神经生物学研究所3

腹部不适和疼痛是炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）和肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）患者的临床常见症状。目前认为内脏高敏感是IBD和IBS患者相关疼痛症状的主要病理生理机制，表现为对直肠扩张刺激的感觉阈值降低和（或）对刺激的反应强度增加[1]。IBD和IBS患者常伴有尿频、尿急、排尿痛等膀胱高敏感并发症，这些并发症加重了对患者生活质量的负面影响，但发病机制尚不清楚。内脏感觉通过胞体位于背根神经节（dorsal root ganglia,DRG）的脊髓内脏传入纤维传递至次级感觉神经元，进而投射至中枢神经系统[2]。DRG内关键分子的调控作用以及表达已成为近年内脏敏感性机制研究的热点。

脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）是神经营养物质家族成员，在中枢和外周神经系统均有表达。近年研究发现BDNF参与调控痛觉的转导[3]，然而系统应用BDNF基因敲除（BDNF+/-）小鼠研究BDNF在内脏敏感性中的调节作用尚未见报道。本研究以三硝基苯磺酸（TNBS）诱导建立BDNF+/-小鼠结肠炎后内脏高敏感模型，旨在探讨BDNF是否参与小鼠内脏敏感性的调节。

材料与方法

一、实验动物和主要试剂

杂合子BDNF+/-C57BL/6小鼠38只和同窝正常野生型（BDNF+/+）C57BL/6小鼠38只由山东大学神经生物学实验室馈赠。从鼠尾组织标本中提取DNA通过聚合酶链反应（PCR）行基因分型。小鼠于（21±1）℃温度、50%±5%空气湿度、避强光的环境中喂养，自由饮水、摄食。

TNBS、苯巴比妥钠（Sigma 公司），ELISA BDNF试剂盒（Promega公司）。BCA蛋白浓度测定试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司），乙醇、多聚甲醛等购自天津市大茂化学试剂厂。……