景艳艳，李世杰，陈茂彬，蒋 威，方尚玲

（教育部发酵工程重点实验室，湖北工业大学生物工程学院，湖北 武汉430068）

栀子果是茜草科植物栀子的果实，含有两种色素：栀子苷（京尼平苷）和类胡萝卜素类的栀子黄色素（藏花素）。栀子黄色素精制过程洗脱的废液中含有栀子苷。研究表明：栀子苷在β－葡萄糖苷酶或β－半乳糖苷酶的作用下，可与伯氨基酸（α－氨基酸）发生聚合反应，生成蓝色色素[1］。近几年来，用于生产β－葡萄糖苷酶的菌株多为黑曲霉、木霉等霉菌属，杆菌属的菌株较少。作者从土壤及菌种保藏室中筛选到4株霉菌、2株杆菌，并利用它们将栀子黄色素精制废液（栀子黄废液）转化为栀子蓝色素，变废为宝，以充分循环利用栀子资源。

1 实验

1.1 材料、菌株与培养基

栀子果，市售。

苏云金芽孢杆菌BT、苏云金芽孢杆菌BT－140、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌BT－7216、嗜热脂肪杆菌和枯草芽孢杆菌，分别编号1＃～7＃，湖北工业大学菌种保藏室。

杆菌斜面培养基[2］：葡萄糖2%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，NaNO30.3%，琼脂2%，pH 值7.0。

杆菌种子培养基[2］：葡萄糖2%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，NaNO30.3%，pH 值7.0。

杆菌发酵培养基：麸皮2%（麸皮加水煮沸后经4层纱布过滤得到的滤液），蛋白胨2%，栀子黄废液10%，KH2PO40.2%，MgSO4·7H2O 0.2%，pH 值7.0。

初筛培养基：葡萄糖2%，蛋白胨2%，酵母膏1%，栀子黄废液10%。

平板分离培养基：栀子黄废液10%，谷氨酸钠0.1%，蛋白胨0.5%，KH2PO41%，MgSO4·7H2O 0.05%，琼脂2%。

PDA培养基：土豆20g，葡萄糖2g，琼脂2g，水100mL，115℃灭菌30min。

霉菌种子培养基：葡萄糖1%，酵母膏0.5%，NaNO30.3%，MgSO4·7H2O 0.2%，KH2PO40.2%。

霉菌发酵培养基：麸皮2%（麸皮加水煮沸后经4层纱布过滤得到的滤液），蛋白胨2%，KH2PO40.2%，MgSO4·7H2O 0.2%，栀子黄废液10%。

1.2 方法

1.2.1 栀子黄色素的提取