彭利剑，赵晓盼，王海杰，赵文秀 (.德惠市人民医院检验科，吉林 德惠 30300;.吉林医药学院008级药学本科，吉林吉林 303;3.吉林医药学院化学教研室，吉林吉林 303)

中国是茶文化的发源地，传统中医、现代医学都重视茶的药用研究［1］。糖多糖除具有降血脂、防治血栓和增强免疫等功效外，近年来还发现粗制多糖对多种肿瘤有抑制作用［2］。我国的产茶区分布广，茶叶品种多，但对茶的成分和功效影响最大的却是茶叶发酵的程度。绿茶为非发酵茶，红茶为充分发酵茶，而乌龙茶属于半发酵茶。茶的鲜叶经发酵后所含的多酚被氧化、叶绿素被分解，因此变为红色、褐色或黑色;此过程中糖的含量和结构也发生改变［3］。目前认为，红茶的糖类含量相对高，组成与结构稳定，从中提取多糖抗肿瘤的研究受到重视。本研究以中国福建的“正山小种”红茶为原料，采用水浸泡的方式提取茶多糖，用大孔树脂层析法制备纯化的红茶多糖(black tea polysaccharides，bTPS)，并采用酪胺还原法标记异硫氰酸荧光素(fluorescinisothiocyate，FITC)，以bTPS和FITC-bTPS为材料，研究纯化红茶多糖对白血病细胞增殖的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 材料

人白血病细胞K562和U937冻存于液氮中;自制bTPS和FITC-bTPS避光保存于-20℃;1640培养液购自Hyclone公司;小牛血清购自浙江黄岩四季青公司;CCK-8细胞增殖检测试剂盒购自碧云天生物技术有限公司。

1.2 细胞培养

复苏K562细胞和U937细胞，在含10%血清的1640培养液、37℃和5%CO2条件下培养，每周传代3次，取对数生长期细胞用于实验。

1.3 细胞增殖检测

将细胞浓度调整为104/mL，按每孔100 μL接种96孔板，用1640培养稀释 bTPS，分别加入到96孔板，使终浓度分别为 0、25、50、75 和 100 μg/mL。……