毛燕群

（重庆市涪陵监狱卫生所 408000）

丙型病毒性肝炎是由丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染引起的传染病，中国HCV感染率约为3.2%，其中40%～60%的感染者可发展为慢性丙型肝炎，部分发展为肝硬化，严重威胁人们的健康［1－2］。HCV感染的早期诊断是预防和治疗丙型肝炎的有效途径。目前HCV检测技术主要为抗－HCV抗体检测和HCV RNA检测，但二者均存在一定的局限性。外周血中HCV核心抗原（HCV core antigen，HCcAg）是HCV颗粒的结构蛋白，在各亚型HCV中高度保守，是理想的HCV感染标志物［3］，其检测对 HCV感染的诊断和治疗具有重要意义。本文针对现存HCcAg检测方法耗时、操作繁琐等不足，建立一种快速灵敏检测HCcAg含量的电化学免疫传感器方法，并对其检测性能进行分析，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 主要试剂与设备 主要试剂：HCcAg和HCV核心抗体（HCV core antibody，HCcAb）购于美国Thermo公司；多壁碳纳米管（multi－wall carbon nanotubes，MWCNTs），纯度大于95%，购于成都有机化学研究所；牛血清清蛋白（bovine serum albumin，BSA）、壳聚糖（chitosan，CS）及氯金酸购自美国Sigma公司。实验所 用 缓 冲液 均 为 含 5mmol／L ［Fe（CN）6］3－／4－和0.1mol／L KCl的 0.1mol／L 磷 酸 盐 缓 冲 溶 液 （phosphate buffered solution，PBS）（pH 7.0），实验用水为双蒸水。主要设备：CHI 660D电化学工作站、玻碳电极（工作电极）、铂丝（对电极）、Ag／AgCl电极（参比电极）、LIBROR AEL－200电子天平（日本岛津公司），BRANSON B3200S－T恒温超声仪（上海必能信超声公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 胶体金的制备 采用柠檬酸钠还原法制备金溶胶［4］，所得金溶胶为酒红色，用透射电子显微镜表征，平均直径约为16nm。

1.2.2 MWCNTs－CS（1.0g／L）的制备 方法参照文献［5］，并在此基础上做了一些改变。配制质量分数为1.0%的醋酸溶液，用NaOH调节pH到5.0。取50mg壳聚糖置于10mL上述醋酸溶液中，在室温下搅拌一段时间制得5g／L的壳聚糖溶液。……