胆红素对L-02细胞凋亡以及Bcl-2及Bax体外表达影响的研究
2012-09-26陈兆夷陈兆武王光明邓衍部刘有理黄志刚
陈兆夷,陈兆武,王光明,邓衍部,刘有理,黄志刚
(1.安徽省宣城市人民医院消化内科 242000;2.安徽医科大学基因重点实验室,合肥230022)
胆红素对L-02细胞凋亡以及Bcl-2及Bax体外表达影响的研究
陈兆夷1,陈兆武2,王光明1,邓衍部1,刘有理1,黄志刚1
(1.安徽省宣城市人民医院消化内科 242000;2.安徽医科大学基因重点实验室,合肥230022)
目的探讨胆红素对健康人肝细胞系L-02凋亡的影响及Bcl-2、Bax基因对凋亡过程的调节。方法将不同浓度的胆红素(终浓度分别为0、100、150、200、250、300mg/L)作用于体外培养的健康人肝细胞L-02,采用流式细胞仪和碘化丙啶(PI)双标等技术观察细胞的凋亡率和免疫组织化学方法检测细胞凋亡状态及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果Bcl-2蛋白的表达,对照组为阴性表达,低浓度组弱阳性表达,高浓度组强阳性表达。Bax蛋白的表达,对照组可见表达,低浓度组表达增多,高浓度组明显增多,强阳性表达。表明Bcl-2蛋白表达越强,凋亡指数越少;Bax蛋白表达越强,凋亡指数越强。结论Bcl-2、Bax蛋白均参与了胆红素所诱导的L-02细胞凋亡的调节,并在细胞凋亡的发生、发展中起重要作用。
胆红素;细胞凋亡;L-02细胞系;Bcl-2;Bax
笔者在前期研究中证明,高胆红素作用可导致L-02细胞先发生凋亡,随后部分凋亡细胞发生继发性坏死,其程度与胆红素浓度呈显著正相关[1]。关于胆红素对L-02细胞凋亡的机制及Bcl-2与Bax表达在其过程中的意义,笔者进行了后续研究,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 主要试剂 胆红素、DMEM培养基为美国Gibco公司产品;小牛血清为杭州四季青生物制品有限公司产品。……
