张晶晶，吕喜英

(1.承德医学院，河北承德 067000;2.承德医学院附属医院肿瘤放化疗科)

肺癌居恶性肿瘤首位，发病率和死亡率均呈上升趋势，占癌症死亡率之首，其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占85%。NSCLC治疗方法主要包括手术、放化疗、分子靶向治疗等，目前以铂类为基础联合第三代新药(异长春新碱、紫杉醇、吉西他滨、培美曲塞等)的化疗方案是NSCLC的标准一线方案，但有效率仅为25%-35%，总生存率仅提高约4.1%[1]。近年来多项研究证实，切除修复交叉互补基因1(ERCC1)与顺铂(DDP)耐药有关，而对于耐DDP的NSCLC患者通过检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态可选择性给予表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)分子靶向治疗，从而提高疗效和改善生存率。本研究采用免疫组化法检测97例NSCLC患者癌组织ERCC1和EGFR蛋白的表达情况，并探讨二者与NSCLC生物学特征的关系，以期为指导NSCLC患者选择化疗方案提供依据，从而提高疗效、降低化疗毒副反应、改善预后。

1 材料与方法

1.1 研究对象 承德医学院附属医院胸外科2008年6月-2010年12月住院接受手术的97例NSCLC患者。男性72例、女性25例，年龄38-80岁，中位年龄58岁。癌组织:97例NSCLC患者肿瘤组织蜡块，癌旁组织:NSCLC患者病理蜡块中随机选取30例癌旁组织蜡块。

1.2 实验方法 MaxVision法免疫组化染色。片厚5μm、抗原修复，以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知的阳性切片作为阳性对照，滴加小鼠抗人ERCC1、EGFR一抗(1:50、1:100)、二抗、DAB显色、苏木素复染、封片。ERCC1和EGFR检测试剂盒和MaxVision试剂盒均购于福州迈新生物技术开发有限公司，操作步骤严格按照说明书进行。

1.3 结果判定 每张切片随机观察5个高倍视野(×400)，每个视野计数100个肿瘤细胞。……