大理地区健康人阴道念珠菌体外药物敏感性研究
2012-09-19陈财发杨泽丽
何 伟,陈财发,姚 毅,朱 文,杨泽丽,白 丽*
(1.大理学院基础医学院,云南大理 671000;2.大理学院公共卫生学院,云南大理 671000)
念珠菌属条件致病性酵母样真菌,常寄生于人体与外界相通的腔道中,如口腔、肠道、阴道等,健康人群携带率较低(口腔中约9%)〔1〕。由各种原因(如HIV感染,抗生素的滥用等)导致机体抵抗力下降、菌群失调或寄生位置发生改变所致的真菌机会性感染呈日益增多的趋势,其中主要是念珠菌病〔2-3〕。随着抗真菌药物在黏膜念珠菌病中的广泛使用,念珠菌的敏感性逐渐降低,耐药株呈现增加趋势。抗真菌药物敏感性的研究变得尤为重要。本文采用美国临床和实验室标准化研究所(The Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI) 推荐的M27-A2方案,即微量液基稀释法,通过对分离自大理地区健康女性阴道念珠菌的药物敏感性的分析,为临床抗真菌药物的选择提供依据。
1 材料与方法
1.1 实验菌株 分离自大理健康人群阴道念珠菌45株。 经过鉴定〔4〕,包括29株光滑念珠菌(Candida glabrata),11株白色念珠菌 ( Candida albicans),4株克柔念珠菌(Candida krusei),1株热带念珠菌( Candida tropicalis) 。
1.2 标准菌株 ATCC10029(大理学院病原生物学综合实验室保存)作为4种药物的敏感性标准株。
1.3 RPMI-1640液的配制 取10.4 g RPMI-1640粉(含L谷氨酰胺,不含碳酸氢钠,GIBCO)溶于900 mL无菌水中,加入34.53 g三氮吗啡啉丙磺酸(MOPS,夏斯生物)至其终浓度为0.165 mol/L,室温下用磁力搅拌器混匀2~3 h,使其充分溶解,用1 mol/L NaOH调pH至7.0(25℃),用灭菌双蒸水定容至1 L,滤过除菌,备用。
1.4 抗真菌药物
1.4.1 储存液 储存液的浓度为应用液10倍,5-氟胞嘧啶(Fluorocytosine,5-FC)和氟康唑(Fluconazole,FCZ) 为1280 μg/mL, 两性霉素B( AmphotericinB,AMB) 和酮康唑( Ketoconazole,KCZ) 为320 μg/mL,分装于-70℃保存备用。4种药物均来源于中国药品生物制品检定所。……
