郝亚宁，骆文龙

(重庆医科大学附属第二医院耳鼻咽喉头颈外科，重庆400010)

面神经作为一条重要的周围神经，主要功能是支配面部肌肉的运动。外伤、邻近组织感染、脑血管意外及医源性损伤都可能损伤面神经。近几年诸多学者对面神经损伤的修复进行了系统研究。由于基因治疗能在分子水平上纠正疾病的发病过程，因此在面神经损伤的防治上有较好的应用前景。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)对感觉神经［1］、副交感［2］及交感神经［3－4］，特别是对运动神经［5－6］的发育、轴索生长都有一定的神经营养性作用和导向作用。超声辐照微泡能将目的基因转入各种靶细胞和靶组织，但它在面神经损伤修复的作用研究，尚未见国内外报道。因此本实验运用超声微泡介导HGF基因转染损伤后的面神经，观察HGF的表达及受损面神经传导速度、神经电位波幅、潜伏期等参数，探讨该方法的有效性，为面神经损伤的修复提供一种新型、高效、安全的方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物

清洁级SD大鼠，40只，雌雄不限，体质量200～250g，由重庆医科大学动物实验中心提供，合格证号:SCXK(渝)2007-0001。

1.2 质粒的提取

HGF菌液由重庆医科大学附属二院肝病研究治疗中心提供，HGF经大肠埃希氏菌扩增16 h后，按质粒大量抽提试剂盒 (Omega公司)说明提取。提取纯化的HGF经酶切电泳鉴定，紫外分光光度计测定其浓度为1 g/L。

1.3 试剂

Trizol试剂，兔抗鼠HGF多克隆抗体和兔抗鼠β-actin多克隆抗体，羊抗兔IgG，化学发光试剂，(武汉谷歌生物科技有限公司);脂质微泡，(重医附二院超声影像学研究所提供)白色冻干粉末状。……