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重组人生长激素对癫痫持续状态大鼠神经元凋亡及XIAP、Caspase-3表达的影响

2012-09-13郝庆伟郑辑英李光来薛国芳

中西医结合心脑血管病杂志 2012年2期
关键词:海马癫痫模型

郝庆伟,郑辑英,李光来,薛国芳,耿 瑜

癫痫持续状态(SE)是常见的临床急症,是细胞层面的自身失控性发作。国际癫痫组织定义为癫痫连续发作之间意识未完全恢复又频繁再发,或发作持续30min以上不自行停止。癫痫连续发作30min后,海马神经元开始死亡[1]。细胞凋亡是SE后脑神经元死亡的形式之一,在SE后脑神经元死亡过程中扮演重要角色。近年来,一些研究表明,生长激素(GH)能改善大脑缺血缺氧引起的损伤,抑制细胞凋亡,促进细胞存活等作用[2,3]。本实验通过应用重组人生长激素(rhGH)观察大鼠SE后大鼠脑组织凋亡相关基因XIAP、Caspase-3的表达情况,探讨rhGH干预对SE导致的神经元损伤的影响及其可能机制,以期为rhGH应用于临床SE的治疗提供动物实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 健康成年雄性 Wistar大鼠54只,鼠龄3个月~4个月,体重180g~240g,山西医科大实验动物中心提供。重组人生长激素注射液由长春金赛药业有限责任公司生产;匹罗卡品购自美国Sigma公司;兔抗鼠XIAP多克隆抗体、兔抗鼠Caspase-3多克隆抗体、TUNEL试剂盒、即用型SABC试剂盒均系武汉博士德公司提供;氯化锂购自中国医药集团上海试剂公司;DAB试剂由北京中杉金桥生物技术有限公司出品;余均为市售分析纯品。

1.2 动物分组及模型的建立 选用健康成年雄性Wistar大鼠54只,随机分为对照组6只,模型组、rhGH组各24只。模型组、rhGH组再分为4个亚组,每个亚组6只,分别对应癫痫持续状态后6h、12h、24h和48h四个时间点。rhGH组颈部皮下注射重组人生长激素0.1U/(kg·d),对照组、模型组颈部皮下注射等容积生理盐水。……

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