日本柳杉花粉变应原CJP-6的重组表达和免疫反应性鉴定①
2012-09-12蒋建国刘瑞玲付永锋程训佳复旦大学上海医学院病原生物学系上海200032
中国免疫学杂志 2012年5期
关键词:血清
蒋建国 刘瑞玲 付永锋 程训佳 (复旦大学上海医学院病原生物学系,上海200032)
花粉症是一种严重影响人类健康的过敏反应性疾病。在日本,日本柳杉(Cryptomeria japonica)花粉是春季空气中的主要变应原,吸入飘散在空气中的花粉会引起花粉特异性的IgE产生,导致过敏性鼻炎、过敏性哮喘等过敏反应性疾病[1],而日本柳杉在我国不同地区的园林中也有大量栽培。
日本柳杉花粉中含有多种变应原蛋白,目前有两种变应原研究的比较详细透彻,已被国际免疫学会变应原命名分会官方认定为主要的变应原,一种是具有果胶酶活性的Cry j 1,一种是具有聚甲基半乳糖醛酶活性的Cry j 2[2]。CJP-6是在日本柳杉花粉中被发现的第3种主要变应原,属于异黄酮还原酶家族,由306个氨基酸组成,具有很高的IgE结合活性和免疫原性[3]。目前,国内临床主要使用花粉浸提液对花粉症患者进行诊断和脱敏治疗,但浸提液的组分非常复杂,容易引起诊断的假阳性和过敏反应,且难以标准化[4]。利用基因工程技术制备日本柳杉花粉变应原CJP-6,有助于诊断与治疗试剂的标准化,促进日本柳杉花粉过敏反应性疾病的诊断与治疗研究。
本研究通过RT-PCR获得上海地区日本柳杉花粉的cDNA,从中克隆和表达了cjp-6基因,并通过Dot blot和ELISA方法检测其与过敏病人血清中IgE的反应性,为过敏性疾病的临床诊断和治疗奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 植物材料 本实验所采用的植物材料是上海地区日本柳杉花粉,采摘后于-80℃保存。
1.1.2 菌株……
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