康 静 毛会丽 闫 欣 刘 瑞 林俊堂 丰慧根 (新乡医学院生命科学技术系，新乡453003)

ADAM，是一类去整合素和金属蛋白水解酶家族(A disintegrin and metalloprotease，ADAM)的英文缩写［1］。ADAM由相互独立但又互补的功能域所构成，包含8个结构域，自N-端至C-端依次为:信号肽、前体结构域、金属蛋白酶域、去整合素域、富含Cys结构域、表皮生长因子结合域，跨膜域和胞质域(图1)［2］，它们在脊椎动物发育过程中，特别是中枢神经系统，扮演重要的角色［3-8］。

图1 ADAM功能形态模型Fig.1 The ADAM function model

相对于其它 ADAM家族成员，ADAM11、ADAM22和ADAM23这3个基因序列的同源性更高，并且主要在脑中表达，因而被归入一个“脑MDC(Metalloprotease/Disintegrin/Cysteine-rich)”亚类［9］。从表达分布来看，ADAM11、ADAM22和ADAM23可能与小脑内运动神经元回路的建立有关［10-12］。ADAM23最初由Sagane等［9］通过基因克隆的方法获得。Northern blot结果表明:人ADAM23主要在脑组织中表达，在心脏中有弱表达，其它组织中的表达量都低于检测下限，而且主要由神经细胞表达［12］。Goldsmith［13］运用原位杂交的方法证实了ADAM23在大鼠海马结构和小脑都有很高的表达量。另外，缺失了ADAM23的幼鼠在出生一周后出现了神经发育缺陷，并在不久后死亡［10］。但是，ADAM23在成年小鼠(Mouse)脑的各个组织的表达情况仍然未知。本实验应用原位杂交方法系统分析ADAM23在成年小鼠脑内的表达分布情况，为探讨ADAM23在脊椎动物中枢神经系统发育过程中的作用提供形态学依据。

1 材料与方法

1．1 材料 实验动物与分组:健康雄性昆明种小鼠20只，体重18～22克，由新乡医学院实验动物中心提供。其中10只小鼠用于原位杂交检测，10只用于RT-PCR检测。

1．2 方法

1．2．1 总RNA的抽提 取10只小鼠断头处死，冰盘上快速取脑，用高温处理过的锡箔纸包裹，液氮中速冻后－80℃冰箱保存待测。……