李平 谭宏月 胡婵 陈丽华 皇幼明 钟彬 朱红梅 温海

(上海长征医院皮肤病与真菌病研究所全军真菌病重点实验室第二军医大学附属长征医院皮肤科，上海 200003)

新生隐球菌易于感染免疫功能低下人群，如HIV感染、器官移植及血液肿瘤患者等，由于其嗜中枢特性，常可导致致命性的中枢神经系统感染。隐球菌荚膜是重要的毒力因子，组成成分包括葡萄糖醛酰木糖基甘露聚糖(GXM)、半乳糖木糖甘露聚糖(GalXM)和少量的甘露糖蛋白(MP)等，其中GXM占多糖成分的90%以上，既可以黏附在细胞壁上形成荚膜结构，也可以释放到培养上清中。GXM可以增强隐球菌抵抗吞噬细胞的吞噬作用，也可以诱导机体产生抑制性细胞因子IL-10、抑制机体产生炎性细胞因子 IL-2、TNF-α 和 IFN-γ等［1-2］，在隐球菌逃逸机体的抗感染免疫中发挥重要作用。我们的前期工作发现隐球菌能下调巨噬细胞MR的表达，因此本文详细介绍了如何从新生隐球菌B3501中分离和纯化GXM，并探讨了隐球菌GXM对巨噬细胞MR表达的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

新生隐球菌采用B3501标准株，由中国医学真菌保藏管理中心隐球菌专业实验室提供。真菌培养基采用YNB培养基 (YNB粉末6.7 g，葡萄糖5 g，氯霉素200 mg，定容至1 L，过滤除菌)及YPD平板 (酵母抽提物10 g，蛋白胨20 g，氯霉素200 mg，琼脂15 g，定容至900 mL，高压灭菌，冷却至60℃后加入无菌的20%的葡萄糖100 mL制成平板)。C57BL/6J(H-2Kb)小鼠，雌性，6～8周龄，购自上海必凯实验动物有限公司。

1.2 主要试剂

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、酵母氮基础(YNB)购自Sigma，CTAB配制成0.3%的水溶液置常温备用。酵母抽提物……