痛泻要方对内脏高敏感大鼠结肠黏膜蛋白质表达谱的影响
2012-09-07孟立娜范一宏
丁 莺 吕 宾 孟立娜 范一宏 沈 雁
杭州市下沙医院急诊科1(310018) 浙江中医药大学附属第一医院消化内科2
肠易激综合征(IBS)是一种常见的胃肠功能紊乱性疾病,西方国家人群的患病率高达10% ~20%[1];我国城市居民患病率为 10.50%,乡村为6.14%[2]。一项韩国研究[3]显示IBS相关症状可对患者的健康相关生活质量(HRQOL)产生重大影响,对社会造成沉重的经济负担。IBS的发病机制目前尚未完全阐明,可能与肠道动力、分泌、感觉等异常相关[4]。蛋白质组学能从组织脏器整体水平上动态定量地观察疾病过程中蛋白质的改变,有助于探寻疾病的发病机制。本研究运用蛋白质组学技术观察痛泻要方对内脏高敏感大鼠结肠黏膜蛋白质表达谱的影响,旨在从分子水平探讨痛泻要方对IBS起效的可能作用机制。
材料与方法
一、主要材料
1.实验动物:清洁级成年雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,体质量约200 g,由浙江中医药大学实验动物中心提供,合格证号:SYXK(浙)2008-003。于室温22~24℃、湿度 <60%、噪音 <50 dB的环境中分笼饲养,正常饮水摄食。
2.痛泻要方煎剂制备:按成人体质量60 kg,痛泻要方包括炒白术15 g、炒白芍12 g、防风10 g、陈皮6 g。大鼠用药量以成人单位体质量的6.25倍计算。取生药颗粒剂,以蒸馏水作为溶剂,充分搅拌使其溶解,配置生药浓度1 g/mL,40℃避光保存,置于避光饮水瓶中。按生药4.5 g·kg-1·d-1,即痛泻要方煎剂4.5 mL·kg-1·d-1给药,由浙江中医药大学附属第一医院制剂室提供。
3.主要试剂:考马斯亮蓝 R-250、二硫苏糖醇(DTT)、尿素、琼脂糖、甘油、溴酚蓝、3-(3-胆酰胺丙基)二甲氨基-1-丙磺酸(CHAPC)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、甘氨酸……
