不同固定液对胃癌细胞骨架及连接蛋白荧光染色标记效果的比较

2012-09-07高建郑倩倩李彦姝周末

中国医科大学学报 2012年10期

关键词：结构

高建，郑倩倩，李彦姝，周末

（中国医科大学 1.实验技术中心三部；2.基础医学院细胞生物学教研室，沈阳 110001）

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，肿瘤细胞的侵袭和转移是恶性肿瘤的主要表现，也是导致进展期胃癌预后差的根本原因。上皮间质化在上皮来源的恶性肿瘤侵袭转移过程发挥重要作用。细胞骨架的形态、结构、功能以及病理变化成为研究热点［1～3］。近期研究报道，细胞骨架结构改变与上皮间质化发生相关［4，5］，上皮间质化发生后可使某些细胞间连接蛋白表达缺失或错误定位。微丝对细胞黏附、铺展、运动、内吞、分裂具有重要调节作用。通过预染微丝来反映细胞骨架变化，已经成为人们研究细胞形态变化、肿瘤侵袭迁移的重要手段。本实验主要采用激光共聚焦扫描显微镜观察3种固定液对SGC-7901胃癌细胞的微丝和细胞连接蛋白Zo-1的影响，探讨不同固定液对细胞骨架和连接蛋白固定效果，选择最佳固定方法，为进一步研究胃肠肿瘤侵袭、转移过程中细胞骨架结构改变及细胞间连接蛋白表达缺失或错误定位提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂和仪器

胃癌细胞系SGC-7901为我校细胞生物学教研室保存。胎牛血清、DMEM高糖培养基，购自美国Gibco公司；Triton X-100，购自日本TaKaRa公司；BSA、FITC-Phalloidin、DAPI，购自美国 Sigma 公司；Zo-1-FITC，购自美国Invitrogen公司。激光共聚焦显微镜（FV-1000），购自日本OLYMPUS公司；二氧化碳培养箱，购自美国Thermo公司。