耿宏伟，秦永丽，李俊平，杨 涛，孙恩成，刘霓红，白安斌，徐青元，王凌凤，赵 晶，覃绍敏，林 俊，郭怡璠，吴东来1,*

（1.东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150030；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001；3.黑龙江省农业科学院，黑龙江哈尔滨 150086；4.广西兽医研究所，广西南宁 530001；5.广西大学，广西南宁 530004）

蓝舌病病毒（Bluetongue virus，BTV），属呼肠孤病毒科、环状病毒属、蓝舌病病毒亚群（Bluetingue virus subgroup），BTV引起的蓝舌病（BT）是由虫媒传播的非接触性反刍动物急性传染病，尤其对纯种细毛羊敏感，死亡率高达35%[1-2]，OIE将其列为实时通报疫病，我国将其规定为一类动物传染病[3]。该病分布范围不断扩大，危害也日趋严重[4-7]。我国于1979年发现该病存在，现已从全国29省检出BTV血清阳性家畜。

BTV基因组约19 Kb，由10个节段的双股RNA组成，编码7种结构蛋白（VP1～VP7）和4种非结构蛋白[8-9]。VP7蛋白由S7基因编码，是BTV群特异性抗原蛋白，由349个氨基酸组成，约占核心蛋白总量的36%。VP7蛋白位于病毒核衣壳的表面，研究表明，各血清型BTV VP7蛋白94%以上的氨基酸保守，其氨基酸序列的相对保守性决定了VP7是群特异性抗原这一特征[10-14]。

BT的诊断方法多种，免疫荧光试验和病毒中和试验需对病毒进行分离培养，操作过程繁琐，并且存在容易散毒等生物安全问题；荧光定量PCR方法成本较高。进口的抗体检测ELISA试剂盒价格昂贵，很难在检测临床样品上普及应用。因此，本研究应用原核表达的BTV-12型VP7蛋白制备群特异性单克隆抗体（MAb），建立了检测BTV抗体的竞争ELISA方法，为BTV提供一种快速、安全、及低成本的检测手段。……