鸡病原肠杆菌的鉴定
2012-08-30陈翠珍史秋梅张艳英马增军张东林
房 海,陈翠珍,史秋梅,张艳英,马增军,张东林
(河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室,河北秦皇岛 066004)
在肠杆菌属(Enterobacter)细菌中,目前研究较多的主要有阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)及产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes),已被确认可以导致条件性致病,引起呼吸道、泌尿生殖道感染,亦可引起菌血症等。本研究对分离于发病死亡鸡的11株肠杆菌,进行了表观性状及系统发育研究,旨在对鸡源肠杆菌的有效检验与防制等提供一定的参考。
1 材料和方法
1.1 细菌分离 采集河北2个养鸡场2004年6月~2005年6月间商品产蛋发病鸡的病变组织进行细菌分离,根据采集养殖场不同分为1组和2组。根据病变特征,分别取病死鸡的肝组织为材料,划线接种于普通营养琼脂培养基,37℃培养24 h~48 h,分别选取纯一或优势生长的菌落移接于普通营养琼脂培养基斜面进行纯培养。
1.2 细菌主要表观性状检验
1.2.1 形态特征检查取纯培养菌制备涂片标本,经革兰染色后镜检。选择代表菌株做磷钨酸负染色标本,置透射电子显微镜下观察。
1.2.2 主要理化性状测定取纯培养菌分别接种于细菌理化特性鉴定用培养基,按常规进行氧化酶、接触酶、糖(醇及苷)类代谢、有机酸盐利用等的理化特性测定[1-4]。
1.2.3 致病作用检验取从两组分离的代表菌株,分别接种于普通营养肉汤37℃培养18 h调成9×108cfu/mL作为供试菌液,经肌肉0.1 ML/只接种健康雏鸡,每个菌株接种5只,同时设立同剂量、同批无菌营养肉汤接种的对照5只,隔离饲养;每天观察其感染后的发病与死亡情况,以复制出与自然病例症状相同并能重新分离到原感染菌作为相应病原菌的判定指标。……
