适应无血清培养的HEK293细胞系的培育
2012-08-30孟其麟李红梅田大勇仇华吉
中国预防兽医学报 2012年5期
孟其麟,孙 元,李红梅,王 楠,田大勇,仇华吉*
(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨 150001;2.延边大学农学院动物医学系,吉林延吉 130001)
血清为血浆去除纤维蛋白的一种复杂混合物,其组成成份包括碳水化合物、血浆蛋白、多肽、脂肪、生长因子、激素、无机物等,这些物质为细胞生长提供营养物质,其中的激素、生长因子、转运大分子的结合蛋白以及促接触和伸展因子对细胞贴壁具有重要作用。
在常规细胞培养中,血清是一种必需成分,但仍存在一些问题。如不同批次之间差异较大[1-2];对于大多数细胞,血清并不是它们在体内增殖的常规环境,只有在组织损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清,因此有些细胞体外使用血清有可能会改变其在体内的正常状态[3]。
无血清培养作为一种细胞大规模培养方案,在避免上述缺点的同时,还有一些新的特性,例如培养液成分明确,不同批次之间各成分含量无差异等,这些特性提高了培养基的稳定性和实验数据的一致性,并简化了纯化和下游加工的过程;另外,无血清培养基不含动物源性大分子蛋白,避免了细胞水平和机体内不必要的相互作用(如疫苗接种过敏[3])。
近年来,重组腺病毒载体作为一种疫苗载体系统发展较快,但现行的腺病毒生产工艺存在产量低、提纯难、无法脱离血清培养等缺点[4-5]。
为解决以上问题,本研究以HEK293细胞为原始材料,培育了一株适应无血清培养的细胞系,并对其病毒增殖特性和稳定性进行研究。……
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