杜爱林,李 爽,姜洪波,李文强,郝 伟,张瑞岭△

(1.新乡医学院生理学教研室,2.河南省生物精神病学重点实验室,3.二附院,4.三附院,新乡 453003)

酒精依赖或称为酒瘾,是一种非要饮酒不可的强迫心理状态,可以连续或周期性出现。丁苯酞(butylphthalide,NBP)是我国成功研制出的具有自主知识产权的一类化学新药,主要用于治疗缺血性脑卒中。研究表明,NBP可抑制谷氨酸释放,抑制Ca2+内流[1]。本实验通过观察NBP作用于酒精依赖大鼠后,戒断症状评分、海马谷氨酸(Glu)含量及N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate acceptor)2B亚基(NR2B)mRNA表达变化,探讨NBP对酒精依赖大鼠的影响。

1 材料与方法

1.1 动物分组及模型制备

郑州大学动物中心提供清洁级成年健康SD雄性大鼠50只(许可证号:scxk(豫)2005-0001),体重200～220 g,随机分为五组(n=10),分别为A:正常组,B:酒精依赖模型组,C:NBP低剂量组,D:NBP中剂量组,E:NBP高剂量组,各组平均体重差别无统计学意义。除正常组外,各组饮含6%(v/v)酒精水溶液28 d[2]。14 d后,NBP用植物油稀释后每日灌胃一次,剂量为低剂量组NBP 10 mg/kg,中剂量组NBP 20mg/kg,高剂量组NBP 40 mg/kg,正常组和酒精依赖模型组等剂量植物油灌胃5 ml/kg。

1.2 药品及试剂

丁苯酞由石药集团恩必普药业有限公司提供。Trizol试剂、SYBR·Premix Ex TaqTM II试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司、引物由上海生工生物工程有限公司合成。谷氨酸标准液购自上海康达氨基酸厂。

1.3 戒断评分

各组动物按Erden等[3]戒断评分表于末次饮酒后6 h观察戒断症状18 min。主要观察指标为大鼠戒断行为体征(刻板行为、激惹性、尾巴强直、异常姿势)和听源性癫痫发作情况。

1.4 高效液相色谱分析谷氨酸水平[4]

大鼠麻醉断头,剥离海马称重,加入1 ml甲醇-水离心液,低温匀浆,取部分匀浆液4℃,10 000×g,离心15 min,取上清,滤膜过滤后-80℃保存待测。……