姚立杰，金海峰，马勇，谢立平

（齐齐哈尔医学院解剖教研室，黑龙江 齐齐哈尔 161006）

肌肉瘤是起源于横纹肌细胞或向横纹肌细胞分化的间叶细胞的一种恶性肿瘤，为儿童软组织肉瘤中最常见的一种，少发生于成人，男性较女性多见，其恶性程度较高。横纹肌肉瘤易发生区域淋巴结转移和血道转移，文献报道区域淋巴转移率为15%～25%，血道转移率可超过50%，而肿瘤的生长、侵袭和转移依赖于血管和淋巴管的生成。近年的研究表明，血管内皮生长因子家族在肿瘤转移过程中起重要作用，血管内皮生长因子D（vascular endothelial growth factor D，VEGF-D）是最近发现与淋巴管生成及肿瘤淋巴道转移有关的因子。本实验通过用S180肉瘤小鼠癌性腹水在小鼠臀部肌层种植，获得稳定的S180肉瘤动物模型［1］，用淋巴管内皮透明质酸受体 1（lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor-1，LYVE-1）作为淋巴管标记物［2］，观察横纹肌肉瘤中VEGF-D促进淋巴管生成的作用，为临床抗淋巴管生成、治疗肿瘤提供有效的方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物、肿瘤细胞及主要试剂

健康昆明小鼠，雌雄不分，体质量18～20 g，由黑龙江省哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心提供。瘤株为S180肉瘤小鼠腹水型，由黑龙江省肿瘤防治研究所提供，经小鼠腹腔接种传代接种并于-70℃冰箱冻存备用。LYVE-1（H-156）多克隆抗体和VEGF-D（X142）单克隆抗体（Santa Cruz公司），DouSP免疫组化双染试剂盒和多聚赖氨酸（福州迈新生物技术开发有限公司），SuperECL Plus超敏发光液（北京普利莱基因技术有限公司）。

1.2 动物模型的制备和标本处理

取S180荷腹水瘤小鼠，消毒腹部，无菌抽取腹腔液。……