赵晓岚 龚业清 李仰琪 李嘉彦

复发性生殖器疱疹(recurrent genital herpes，RGH)是生殖器部位皮肤粘膜感染单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)引起的性传播疾病。该病的易复发性与患者细胞免疫功能紊乱有关［1］，为阐明RGH患者免疫异常的机制，我们采用流式细胞数检测RGH患者外周血淋巴细胞CD80/86及CD4+/CD8+T淋巴细胞中B7－CD28/CTLA－4(CD152)的表达，探讨T淋巴细胞活化协同刺激通路在RGH发病机制中的作用。

材料与方法

1.临床资料

50例RGH患者均符合RGH的诊断标准，设为患者组。年龄22～66岁，平均(37.76±12.20)岁;所有患者均未接受免疫抑制剂治疗，且排除自身免疫性及其他感染性疾病。正常对照组20例为健康体检者，与患者组年龄，性别差异无统计学意义。

2.试剂及仪器

荧光标记单克隆抗体CD80－FITC、CD86－PE、CD4－FITC、CD8－FITC、CD28－PE、CD152－PE，同型对照鼠抗人IgG1－FITC、IgG1－PE双色标记抗体均购自美国eBioscience公司，流式细胞仪为美国BD公司出品。

3.方法

(1)标本：分别抽取50例RGH患者和20例健康体检者外周血2ml，15%EDTA抗凝，6h内送检。

(2)直接免疫荧光标记：取抗凝全血100μL，加人荧光抗体(CD4－FITC/CD28－PE;CD8－FITC/CD28－PE;CD4－FITC/CD152－PE;CD8－FITC/CD152－PE;CD8y0－FITC/CD86－PE)各20μL。每份血标本设同型对照，对照管中加人抗凝血100μL，加人荧光抗体IgG1－FITC、IgG1－PE20Ul.室温避光孵育30min，溶血，上机检测。

(3)流式细胞仪检测：经Fs/ss设定淋巴细胞群为A门，依次上机检测标本，每份标本测定10000个以上淋巴细胞。

4.统计学处理

统计学方法：本数据采用SPSS11.0统计软件包进行分析，患病组与对照组间比较采用SNK－q方差分析法进行检验。

结 果

1.外周血淋巴细胞CD80、CD86阳性表达

RGH患者组与对照组比较，CD80、CD86的阳性表达较对照组明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞CD28/CD152的阳性表达

对照组CD8+/CD28阳性表达显著高于患者组，差异有统计学意义(P＜0.05)，患者组的CD4+/CD152、CD8+/CD152的阳性表达显著高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。……