结核分枝杆菌的检验与分型
2012-08-15徐三
徐三
(东阳市疾控中心 浙江东阳 322100)
结核分枝杆菌的检验与分型
徐三
(东阳市疾控中心 浙江东阳 322100)
目的结核患者的结核分枝杆菌检验和分型。方法采用PCR及琼脂糖凝胶电泳技术,针对124株结核分枝杆菌的6个可变重复位点做了检验,并应用Gel-Proanalyzer3.0软件及BioNumerics(Version3.0)软件对检验结果做了相关的基因型分析,又分析了基因检测与分型之间的关系。结果136株结核分枝杆菌共分为37个不同的VNTR类型,成簇基因型占74.26%(101/136),单一基因型占25.74%(35/136)。结论耐药菌株的检测在分布上存在统计学的差别。
结核分枝杆菌 检验 分型
在分子生物学发展的今天,我们通常利用可变数目串联重(variablenumbertan demrepeat,VNTR)分型技术对结核分枝杆菌的检验与分型,它具有操作简单,分型信息为数字型的,是可以重复的,实验室内与实验室间具有可比性,所以用大量样本做了分析,通过对结核分枝杆菌的检验和检测,得出的结核杆菌的检验与分型数据,也为各项研究提供了依据。
1 材料
1.1 菌株的来源
菌株的来源:由结核病防治所提供的136株结核分枝杆菌菌株,通过临床分离株进行分析。
1.2 主要实验试剂
TaqDNA聚合酶、dNTP、GoldViewTMDNA染料的准备;实验中所用PCR材料的准备;100bpDNAladder的购进。
1.3 主要实验仪器
生物安全柜、台式高速离心机、培养箱、DNA的自动扩增仪、恒压恒流电泳仪及凝胶成像系统。
1.4 所用到的软件
BioNumerics方面的,进行统计分析的软件;利用SPSS做统计工作的软件。
2 结果
(1)对136株临床分离株的菌种进行鉴定后的结果。利用PNB及TCH对136株临床分离菌做实验,利用它在培养基中所出现的问题对结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非结核性分枝杆菌做进一步的分析,得到的最后结果:136株临床分离株被鉴定为结核分枝杆菌。……
