李 宁，张义龙，李淑英，李志怀

（承德医学院附属医院骨外一科，河北 承德 067000）

前交叉韧带（anterior cruciate ligament，ACL）损伤后常导致严重的膝关节不稳，从而引起继发的半月板和关节软骨的损伤，为恢复膝关节的正常结构和功能，常需要手术行ACL重建术。在移植物的选择方面，腘绳肌腱近年来应用较多，主要是因为四股腘绳肌腱强度较高，取材部位创伤小，术后恢复快［1］。但是，移植肌腱在骨道中的愈合属于腱－骨愈合，相对于骨－骨界面愈合，其愈合时间较长［2］，限制了患者早期的康复练习。如何促进腱－骨愈合成为近年来学者们关注的一个焦点。本实验的目的是通过在骨道中注入自体骨髓单个核细胞，以促进腱－骨界面愈合。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物及分组 24只新西兰大白兔（由承德医学院实验动物中心提供），体质量2.0～2.5kg，平均2.26kg。实验前检测双侧膝关节未见畸形，前后抽屉试验及侧方应力试验均阴性。双侧膝关节均接受手术，随机选取一侧膝关节作为实验侧，对侧作为对照侧。

1.1.2 医用耳脑胶 医用耳脑胶为广州白云医用胶有限公司生产，固化时间小于15s，聚合热低，局部刺激小，体表应用固化膜脱落为7～10d，体内约4周可降解为水溶性物随代谢排出体外。

1.2 方法

1.2.1 自体骨髓单个核细胞的获得 经耳缘静脉注射3%的戊巴比妥钠溶液（1mL／kg）将动物麻醉，双侧髂骨部消毒，用含有0.5mL肝素的10mL注射器，从双侧髂骨快速抽取骨髓各5mL，放入无菌离心管，1500r／min离心15min，取中间细胞层移入另一管内，加入磷酸盐缓冲液（PBS）后再次1500r／min离心10min，弃上清，保留沉淀部分，再加入0.5mL PBS液吹打成单核细胞悬液，备用。……