张凤娥，欧阳恒

1.怀化医专针灸推拿美容系(湖南怀化418000)

2.湖南中医药大学第二附属医院外科(湖南长沙410007)

近年来，我们采用调肾祛斑颗粒(前身为“清色 灵”冲剂)治疗黄褐斑［1］取得满意疗效［2－4］，为探讨其作用机理，以便为临床应用提供科学依据，我们与沙棘冲剂［5，6］进行对照，观察调肾祛斑颗粒(TSQBG)含药血清对长波紫外线(UVA)照射后的体外原代培养的人皮黑素细胞(MC)的细胞增殖的影响，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞标本 取自无病变的健康青年因包皮过长而行包皮环切术后切除的包皮。

1.1.2 主要试剂 四甲基偶氮噻唑蓝(MTT，美国Sigma公司产品)，二甲基亚砜(DMSO)，0.5%脱氧胆酸钠(上海华美生物工程公司产品)，1∶1乙醇乙醚，含10%二甲基亚砜的1N NaOH溶液，氨基甲酸乙酯(广州化学试剂厂产品)等。

MCDB 153培养液的配制:(1)基础培养液:成分主要为MCDB153培养基17.6 g/L，其中添加成分的终浓度分别是 CT 0.2 μg/ml，IBMX10－4mol/L，TPA8 nmol/L，氢化考的松 0.5 μg/ml，胰岛素 5 μg/ml，青霉素100U/ml，链霉素100μg/ml，含 FCS 的终浓度为0.5%。0.22 μm滤膜的不锈钢滤器过滤除菌，分装至100 ml无菌玻璃瓶中，－20℃保存。(2)生长培养液:基础培养液，加胎牛血清至终浓度为10%，4℃保存。

1.1.3 实验器材 SM－3自动化酶免分析仪(北京天石医疗用品制作所)。6 cm塑料培养皿，96孔培养板等不同规格一次性细胞培养用品(美国Corning公司)。YXQ－LS－5O5II立氏压力灭菌器(上海博讯实业有限公司)。0.22 μm孔径的微孔滤器。AP250D－0电子天平(瑞典Ohaus corporation)。恒温水浴箱(北京长风仪器仪表厂)。－20℃低温冰箱(海尔公司)。UVA光源:紫外线灯管由四根并排的TLK40 W/1OR灯管组成(Philips产品)，产生UVA功率为40 W，波长365 nm(范围340～400 nm)。PMA2100紫外线辐照计，连接PMA211OUVA辐照探测头(北京师范大学光电研究所)。……