宋和梅（连云港市第一人民医院药学部，江苏连云港 222002）

环孢素A（Cyclosporine A，CsA）具有强大的免疫抑制作用，主要用于器官移植术后的抗排异治疗和预防，由于其治疗窗狭窄、药动学个体差异大，临床应用需要对其实施治疗药物监测，优化给药方案，减少其毒副反应的发生，提高移植的成功率。当前，监测CsA血药浓度的分析方法主要是免疫分析（IA）法和高效液相色谱（HPLC）法。IA法主要包括荧光偏振免疫（FPIA）法、酶放大免疫分析（EMIT）法和放射免疫分析（RIA）法。RIA法因放射性污染、特异性较差已少用；FPIA法由于操作简便、快捷被临床广泛使用，近期因试剂供应问题国内已停止使用；与此同时，EMIT法得到了快速推广，但EMIT法试验条件苛刻，试剂的稳定性和重复性不及FPIA法。本试验建立了快速、灵敏、准确、实用的全血CsA浓度HPLC分析方法，以满足CsA治疗药物监测的需要。

1 材料

1.1 仪器

Waters高效液相色谱仪，包括600E四元梯度泵、在线脱气机、柱温箱、996二极管阵列检测器、Empower色谱工作站、Empower System Suitability软件（美国Waters公司）；Milli-Q超纯水器（美国密里博公司）；AE240电子分析天平（瑞士Mettler公司）；MS2振荡器（德国IKA公司）；干热式样品浓缩器（美国Pierce公司）；TDL80-2B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；溶剂过滤器（天津市威仪科技发展有限公司）；HP-01无油真空泵（天津市鑫洲科技有限公司）。

1.2 试药

CsA（纯度：99%）、环孢素D（CsD）（内标，纯度：95%）均为福建微生物研究所提供；甲醇、乙腈为色谱纯，乙醚（使用前重蒸）、氢氧化钠、盐酸、正己烷为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Nova-pak C1（8150 mm×3.9 mm，4 μm）；流动相：乙腈-甲醇-水（30.8∶51.2∶18）；流速：1 mL·min－1；柱温：55℃；检测波长：210 nm；进样量：20 μL；……