谭 蓓 戴张晗 吕 红 王 鸥 杨 红 钱家鸣#

中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院消化内科1(100730)内分泌科 卫生部内分泌重点实验室2

目前认为炎症性肠病(IBD)是以遗传易感性为基础，环境因素参与，黏膜免疫系统对肠腔内抗原物质(如共生菌)的异常免疫应答而造成的肠道损伤。近年研究发现，除具有调节钙、磷代谢的传统作用外，维生素D(VitD)还具有抗感染和调节免疫的作用［1］。IBD患者普遍存在VitD缺乏，且与病情程度相关［2］，目前两者的关系日渐受到关注。本研究采用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠结肠炎模型，通过给予不同剂量VitD3干预，旨在探讨VitD3对大鼠实验性结肠炎的疗效及其作用机制。

材料与方法

一、实验动物、主要试剂

雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠66只，4～8周龄，体质量0.20～0.25 kg，购自北京大学医学部实验动物科学部，于北京协和医院动物中心SPF级实验室饲养。

TNBS、活性 VitD31，25(OH)2D3购自 Sigma 公司;5-氨基水杨酸(5-ASA)为德国Dr.Falk Pharma GmbH生产的美沙拉嗪灌肠液;VitD3(商品名:英康利)购自上海信谊金朱药业有限公司。髓过氧化物酶(MPO)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。RNAprep pure动物组织总RNA提取试剂盒、Quant cDNA第一链合成试剂盒、2×Taq PCR MasterMix均购自天根生化科技(北京)有限公司。

二、研究方法

1.结肠炎模型的建立和药物干预:将大鼠随机分为11组，每组各6只。根据Morris等［3］的方法，将TNBS 100 mg/kg溶于50%乙醇溶液0.25 mL后灌肠各组大鼠(除外空白对照组)，以制备结肠炎模型。造模24 h后开始药物干预，具体方法见表1。造模第10 d处死大鼠，心脏取血和采集结肠组织。

2.结肠炎病情评估:每日观察大鼠体质量变化、大便性状和隐血等情况，行疾病活动指数(DAI)评分［4］。……