黄伟炜，杨 莹，刘 宁

(1海南省人民医院，海口570311;2黑龙江护理高等专科学校)

青蒿琥酯是青蒿素的衍生物，具有良好的水溶性和抗疟效果，同时表现出强大的抗肿瘤活性［1］。研究［1，2］发现，青蒿琥酯具有很强的抗结肠癌作用，但对于其抗癌机制尚不清楚。我们的前期研究结果表明，较低浓度(＜15μmol/L)的青蒿琥酯即可抑制体外培养的人结肠癌HCT-8细胞增殖、迁移［3］。2010年6月1日～2011年6月30日，我们观察了青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞诱导血管新生的影响，并观察了经青蒿琥酯作用的HCT-8细胞的血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)的表达变化。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 青蒿琥酯购于桂林南药股份有限公司(批号H10930195)，用于实验时先用0.5%的NaHCO3溶解，再用生理盐水配置成所需浓度。VEGF鼠单抗和Ang-2兔多抗购于Santa Cruz公司。EliViaionTMplus鼠/兔通用试剂盒和DAB显色试剂盒购于迈新生物公司。

1.2 细胞培养 人结肠癌HCT-8细胞(由中国科学院生物化学与细胞生物学研究所提供)置含10%胎牛血清的RPMI1640培养液，于37℃、5%CO2培养箱培养。待细胞处于对数生长期时分组，青蒿琥酯组分别加入不同浓度青蒿琥酯，阳性对照组不加任何药物;同时设阴性对照组(为单纯RPMI1640培养基)。

1.3 大鼠主动脉环体外生长实验 将青蒿琥酯组、阳性对照组细胞用RPMI1640冲洗3次，放入无血清RPMI1640培养液中孵育4 h;离心收集细胞后用无血清RPMI1640液稀释至1×106/mL，继续培养24 h。无菌条件下1 200 r/min和12 000 r/min分别离心10 min，获得条件培养液。取1 mm长大鼠新鲜胸主动脉环30个，置入由纤维蛋白原、牛凝血酶、无血清培养液MCDB-131等混合制成的凝胶中，于37℃、5%CO2培养箱中孵育3 d。……