王 敏，程善光，季万胜

(潍坊医学院附属医院，山东潍坊 261031)

核因子-κB(NF-κB)是一种具有多向性转录调节功能的蛋白，在许多恶性肿瘤中均有高表达［1，2］，与肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭和转移等密切相关。Caspase-9是一种促凋亡因子，是内源性细胞凋亡传导通路中最重要的凋亡启动因子，其活化能启动级联激活反应而促进细胞凋亡［3］。2010年1月～2010年11月，我们采用免疫组化法检测了NF-κB与Caspase-9在胃癌组织中的表达，并分析其与临床病理特征的关系，旨在探讨其在胃癌发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 同期行手术切除并经病理证实的胃癌组织标本68份(胃癌组)，患者男48例，女20例，年龄20～79岁，中位年龄59.5岁。根据WHO分类标准，低分化/Ⅲ级胃癌23例，高、中分化/Ⅰ、Ⅱ级胃癌45例;有淋巴结转移38例，有浆膜浸润40例。患者术前均未行化疗、放疗和免疫治疗。另取距离癌灶5 cm以上癌周正常组织作为癌旁组。

1.2 NF-κB、Caspase-9表达检测 所有组织标本均经10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，制备4 μm厚连续切片，采用免疫组化法检测NF-κB和Caspase-9表达。兔抗人Caspase-9抗体、兔抗人NF-κBp65抗体均购于武汉博士德公司，PV-9000二步法所用免疫组化检测试剂及DAB显色试剂盒购于北京中杉生物科技有限公司，严格按说明书操作，用已知的阳性片做阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定:NF-κB、Caspase-9阳性表达为细胞质和/或胞核染成棕褐色或棕黄色。随机抽取有代表性的10个连续的高倍视野(×400倍)，每个视野计数100个细胞，均值为该切片的积分值。根据染色强度及阳性细胞比例进行综合评分。……