张永翠 刘瑞风 任国华 朱爱茹 王 荣 李新华 尹国华 张开明

(菏泽市中医医院皮肤科，菏泽274000)

我们前期研究发现，银屑病患者BMMSCs生物学活性有异常，并发现1例父母均为银屑病的患者BMMSCs 在原代培养时即自发转 化 为 VEC［1，2］。BMMSCs是骨髓中除造血干细胞以外的另一类多能干细胞，具有自我更新和多向分化潜能，已证实这类细胞在合适的体内外特定条件下可向成骨、软骨、神经、肌肉、皮肤和VEC等多种类型的成熟细胞分化［3-5］。VEC在银屑病发病中有重要作用，因此，我们设想银屑病患者BMMSCs可能有易于向VEC分化的倾向，BMMSCs-VEC分化发育系统在银屑病微血管异常中可能发挥重要作用。为此，我们将银屑病患者和正常对照BMMSC体外定向分化为VEC，并对分化过程及分化的的VEC活性进行初步研究，研究结果验证了开始的设想，现将结果报道如下:

1 材料与方法

1.1 标本来源 银屑病组20例，均为本院皮肤科临床及病理确诊为银屑病的门诊患者，就诊前2个月内未系统使用过糖皮质激素、维甲酸类药物和免疫抑制剂。其中男12例，女8例;年龄20～45岁，平均30.56岁，病程7天～18年;皮损范围占体表面积10% ～80%。对照组15例，取自本院血液科骨穿检查正常的骨髓，性别、年龄与患者组匹配。取材均经患者同意。

1.2 主要试剂及仪器 胎牛血清(hyclone)、DMEM/F12培养基(hyclone)、人淋巴细胞分离液(天津灏洋)、胰蛋白酶(Sigma)，FITC-鼠抗人CD44、PE-鼠抗人 CD34、PE-鼠抗人 HLA-DR、FITC-鼠抗人CD45、FITC-鼠抗人CD29的单克隆抗体(BD公司)、鼠抗血管性假血友病因子(VonWillebrand Factor，VWF，Invitrogen)单克隆抗体、体外血管成形试剂盒(Millipore)、血管内皮生长因子(Vascularendothelial growth factor，VEGF，Sigma)、碱性成纤维细……