宫颈癌细胞通过分泌TSLP促进自身细胞活力①
2012-07-30孟玉菡李明清李大金
谢 锋 孟玉菡 李明清 李大金
(复旦大学附属妇产科医院暨妇产科研究所生殖免疫教研室,上海200011)
胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种IL-7样细胞因子,最早在胸腺间质细胞株培养上清液中发现。TSLP是身体和环境界面(皮肤、呼吸道、肠道、眼组织等)介导Th2反应的关键因子。近期研究发现,除了上皮细胞和表皮角质细胞外,多种细胞包括肥大细胞、呼吸道平滑肌细胞、纤维细胞、树突细胞(DCs)、滋养细胞以及肿瘤和肿瘤相关细胞均可表达 TSLP[1]。
TSLP参与多种病理生理过程。如通过活化树突细胞促使CD4+T细胞呈现Th2免疫优势[2],直接活化T细胞受体促进T细胞增殖、产生Th2型细胞因子和促进B细胞发育和分化。此外,皮肤T细胞淋巴瘤患者血清TSLP的表达增高[3]。TSLP诱导的Th2型炎性反应与胰腺癌和乳腺癌的进展和预后不良有关[4,5]。我们课题组的前期工作发现,人早孕期滋养细胞分泌的TSLP能促进自身增殖和侵袭[6]。考虑到滋养细胞与肿瘤细胞具有相似的生物学特性,因此本研究是在前期研究的工作基础上,检测宫颈癌细胞是否表达TSLP,并分析TSLP对宫颈癌细胞的细胞活力的调节作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞来源 人宫颈癌细胞株(HeLa和Cas-Ki)均购自中国科学院细胞库。
1.1.2 试剂DMEM-F12培养液、胎牛血清为Gibco公司产品;人TSLPELISA试剂盒和人重组的细胞因子TSLP均购自R&D公司;PE结合的抗人TSLPR流式抗体及其同型对照购自Biolegend公司;MTT购自Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 ELISA检测 HeLa和 CasKi细胞培养上清TSLP的浓度 将1×105细胞的HeLa或CasKi细胞接种于24孔板中,分别收集培养24、48和72小时的培养上清。……
