钾通道在系统性红斑狼疮T细胞中的作用研究①
2012-07-30邱红霞赵阴环朱桂启赵海慧付冰冰刘鑫钰
邱红霞 赵阴环 朱桂启 赵海慧 付冰冰 刘鑫钰
(哈尔滨医科大学附属二院风湿免疫科,哈尔滨150086)
系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种累及多系统多器官的慢性自身免疫性疾病,其特征是免疫系统紊乱,导致抗核抗体(Antinuclear antibody,ANA)等自身抗体的产生、免疫复合物的沉淀以及补体系统的激活。SLE发病机制尚未完全明确,近年来国内外研究发现T淋巴细胞钾离子通道 Kv1.3(Voltage-gated potassium channel)和IKCa1(Intermediate-conductance calcium-activated potassium channel 1)对于启动和维持免疫反应至关重要。本研究检测了SLE外周血T细胞活化时Kv1.3及IKCa1通道的表达,以及阻断Kv1.3通道后对SLE患者 T细胞增殖的影响,分析Kv1.3通道在SLE患者T细胞活化中的作用。探讨Kv1.3通道作为SLE免疫治疗靶点的可能性。
1 资料与方法
1.1 临床资料 33例SLE患者来自哈尔滨医科大学附属第二医院风湿免疫科2011年7月至2011年12月的住院患者,其中女性30例,男性3例,平均年龄35岁,所有患者均符合1997年美国风湿病学会(ACR)修订的SLE分类标准。采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)-2K评分评估疾病活动性[1];健康对照组12人为我院体检中心的健康人,其中女性8名,男性4名,平均年龄32岁,均无风湿病史和风湿病家族史。研究组与对照组性别、年龄构成上差异无统计学意义。本研究经哈尔滨医科大学附属第二医院伦理委员会批准,并取得受试对象的知情同意。
1.2 方法
1.2.1 主要仪器和试剂 PCR扩增仪(德国 Eppendorf公司);Lightcycler2.0实时定量PCR仪(德国QIAGEN公司,型号 RG-3000);UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津公司);酶标仪(瑞士TECAN公司)。人淋巴细胞分离液(Ficoll-Hypaque)(天津灏洋生物制品科技有限公司),纯化抗人CD3单克隆抗体(美国eBioscience公司,克隆……
