朱傲雪 杨 颖 张嘉敏 杨启修 高欢欢 朱自严

(上海市血液中心输血研究所血型参比实验室，上海200051)

人类中性粒细胞抗原(Human neutrophil antigens，HNA)是位于中性粒细胞膜上的多肽结构。目前已知有五类 HNA系统，分别是 HNA-1、HNA-2、HNA-3、HNA-4和 HNA-5，其抗原分别位于 CD16、CD177、胆碱转运子样蛋白2、CD11b 和CD11a 上［1，2］。

HNA同种抗体与多种临床疾病相关，例如同种免疫新生儿中性粒细胞减少症，自身免疫中性粒细胞减少症和输血相关性急性肺损伤(Transfusion-related acute lung injury，TRALI) 等［1］。其中 TRALI是在输血过程中或输血后6小时内发生的一种急性呼吸窘迫综合征，严重者可引起死亡。大部分的TRALI，是由于输注的血液制品中含有白细胞抗体(-HLA 和-HNA) 引 起 的［3］。HNA-1a、HNA-1b、HNA-2a、HNA-3a相应抗体都有可能引起TRALI，其中抗HNA-3a抗体最常见，尤其在致命性TRALI病例中［4］。因此了解HNA的分布及其分子特征，对于评估HNA同种抗体引起疾病的风险很重要。

本研究采用文献已报道的引物，建立序列特异性引物聚合酶链反应(Polymerase chain reaction-sequence specific primer，PCR-SSP)作为主要检测方法，对上海地区326份随机健康献血者样本的HNA-1、3-5各系统进行基因型分析，利用测序或PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)等方法进行分子特征分析;而HNA-2a抗原表达主要受转录剪切影响，无法采用以DNA为基础的分析方法，因此我们另外随机采集了同一地区91名健康献血者的新鲜外周血，用流式细胞仪分析HNA-2a抗原表达情况。

1 材料与方法

1.1 研究对象 326份血样和91份新鲜血样均来自上海市血液中心职工或随机健康献血者，所有血样均为EDTA抗凝的外周血，并获取知情同意。

1.2 主要试剂及仪器 DNA提取试剂盒(北京天根公司);金……