胥 颖，何 娟，徐科伟，肖 娇

(四川省医学科学院·四川省人民医院病理科，四川 成都 610072)

病理组织石蜡切片制作，首先经过组织固定，随后是脱水、透明、浸蜡处理，这些步骤通过全自动密闭式组织脱水机来完成。我科在1998、2004、2008年先后购置日本樱花(SAKURA)公司3种不同型号全自动密闭式组织脱水机，在使用过程中我们出现过操作不当，也积累了经验，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器 材料:我院活检标本和外科手术标本。仪器:SAKURA VIP-ETP-300型、Tissue-Tek-VIP5型和Tissue-Tek-VIP6型全自动密闭式组织脱水机，为日本原装进口，每台附带不锈钢脱水篮2只，可容纳300个包埋盒，塑料包埋盒为国内产品。

表1 常用组织标本处理程序

1.2 方法

1.2.1 组织固定 新鲜组织取材后，装入写有外检编号的塑料包埋盒内，放入AAF液(甲醛150 ml、85%乙醇800 ml、冰醋酸50 ml配成1000 ml)中固定1～3 h后，不经水洗直接进入脱水机进行组织处理，处理时间从pm5:00至次日am8:00，共计15小时。

1.2.2 编辑程序 根据工作时间的不同设置多个处理程序，在显示屏操作界面“菜单”上进行人机对话，将相关数据输入脱水机，完成程序编辑。

1.2.3 常用组织标本处理程序 见表1

2 结果

经该程序处理的组织标本脱水、透明和浸蜡充分，软硬适中，有弹性，效果好，组织切片厚2～3 μm，厚薄均匀，染色鲜艳，色泽清晰绚丽。制作的切片达到优质切片质量标准。

2.1 HE染色 组织和细胞结构清晰，核染色质、核膜界限清楚，胞浆及间质染色鲜艳(图1)。

2.2 特殊染色 Masson、PAMS、PAS、GMS、Alcian blue、Giemsa、Gondon-Sweet、AgNOR、石碳酸复红、亚甲蓝等染色，色泽艳丽，层次清楚，对比明显(图2、图3)。

2.3 免疫组织化学染色 CEA、CK、Vimentin、

GFAP、CD20、CD45、Ki67等免疫标记及癌基因蛋白产物c-erbB-2、p53抗癌基因蛋白、乳腺激素受体ER、PR检测，组织切片中棕黄色反应产物清晰可见，阳性着色强度明显，界限清楚，定位准确(图4)。……