方 芳，李 珍，王烈成，祝 延，2，周 艺，柯道平，朱洁平

(1.安徽医科大学生理学教研室，安徽 合肥 230032;2.蚌埠医学院生理学教研室，安徽蚌埠 233000;3.安徽医科大学附属六安医院，安徽 六安 237000;4.皖西卫生职业学院，安徽 六安 237000)

脑缺血性疾病是神经系统常见病症，其中以缺血/再灌注后导致神经元凋亡所引起的继发性脑损伤危害最大，常导致严重的神经功能障碍［1］。如何降低脑缺血病人的发病率，减少缺血所致神经细胞的凋亡，提高病人的存活率，是目前预防脑缺血性疾病急需解决的问题。白藜芦醇(resveratrol，Res)是广泛存在于葡萄、虎杖、花生、决明等植物性食物或药物中的多酚类化合物，近年来的研究表明Res对人体许多重要器官，比如肾脏、脑、心脏的缺血损伤都具有保护作用［2－3］。而缺血预处理可以减少脑缺血性损伤，减少细胞的凋亡及坏死［4］。我们近期的研究证明Res预处理对脑缺血/再灌注具有一定的神经保护作用［5］，但其保护作用机制是否涉及到凋亡及其相应的信号转导通路，目前尚未见报道。为此，我们利用TUNEL法和免疫组化法对大鼠海马CA1区神经元凋亡及相应凋亡蛋白进行检测，以期能够对Res的神经保护作用机制进行进一步探讨，从而为临床研发预防脑血管疾病的新药提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂、仪器 白藜芦醇，Sigma公司;兔抗鼠 Caspase-3、PI3K、p-Akt多克隆抗体均购自 Bioworld公司;细胞凋亡原位检测试剂盒(In Situ Cell Death Detection Kit，POD)，Roche 公司;光学显微镜及其拍照分析系统，日本Olympus公司。

1.2 动物分组 ♂SD大鼠60只(220～250 g)，由安徽医科大学实验动物中心提供，随机分为3组:假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)、白藜芦醇预处理组(Res+I/R)，每组20只。……